中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2010年
4期
114-120
,共7页
邱振华%石鹏君%刘素纯%姚斌
邱振華%石鵬君%劉素純%姚斌
구진화%석붕군%류소순%요빈
链霉菌Streptomyces fradiae var.k11%甘露聚糖酶%manS221 基因%蛋白酶抗性
鏈黴菌Streptomyces fradiae var.k11%甘露聚糖酶%manS221 基因%蛋白酶抗性
련매균Streptomyces fradiae var.k11%감로취당매%manS221 기인%단백매항성
通过设计简并引物和TAIL-PCR的方法从Streptomyces fradiae var.k11中克隆得到一个β-1,4-甘露聚糖酶编码基因manS221,其全长1359 bp,编码452个氨基酸,前端28个氨基酸为预测信号肽.构建表达载体pET-28a-manS221并转化大肠杆菌BL21(DE3),特异性表达manS221基因,重组的甘露聚糖酶通过Ni-NTA亲和层析纯化.酶学性质分析表明,重组甘露聚糖酶最适温度为52℃,最适pH值为6.0,在pH 5.0～9.0的范围内有良好的稳定性,并且对中性蛋白酶具有高抗性.这些优良的性质使得ManS221在食品、饲料和纺织工业生产中具有良好的应用前景.
通過設計簡併引物和TAIL-PCR的方法從Streptomyces fradiae var.k11中剋隆得到一箇β-1,4-甘露聚糖酶編碼基因manS221,其全長1359 bp,編碼452箇氨基痠,前耑28箇氨基痠為預測信號肽.構建錶達載體pET-28a-manS221併轉化大腸桿菌BL21(DE3),特異性錶達manS221基因,重組的甘露聚糖酶通過Ni-NTA親和層析純化.酶學性質分析錶明,重組甘露聚糖酶最適溫度為52℃,最適pH值為6.0,在pH 5.0～9.0的範圍內有良好的穩定性,併且對中性蛋白酶具有高抗性.這些優良的性質使得ManS221在食品、飼料和紡織工業生產中具有良好的應用前景.
통과설계간병인물화TAIL-PCR적방법종Streptomyces fradiae var.k11중극륭득도일개β-1,4-감로취당매편마기인manS221,기전장1359 bp,편마452개안기산,전단28개안기산위예측신호태.구건표체재체pET-28a-manS221병전화대장간균BL21(DE3),특이성표체manS221기인,중조적감로취당매통과Ni-NTA친화층석순화.매학성질분석표명,중조감로취당매최괄온도위52℃,최괄pH치위6.0,재pH 5.0～9.0적범위내유량호적은정성,병차대중성단백매구유고항성.저사우량적성질사득ManS221재식품、사료화방직공업생산중구유량호적응용전경.
