猪圆环病毒2型cap基因与猪γ-干扰素基因双表达载体的构建及稳定表达
저원배병독2형cap기인여저γ-간우소기인쌍표체재체적구건급은정표체
  • 万方数据
    畜牧与兽医 축목여수의
    ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
    2010年 12期 67-72 ,共6页

    娄忠子%杨彬%兰喜%李学瑞%李志勇%殷相平%李宝玉%柳纪省

    루충자%양빈%란희%리학서%리지용%은상평%리보옥%류기성

    猪圆环病毒2型%核衣壳蛋白%猪γ-干扰素%双表达载体%抗性筛选 豬圓環病毒2型%覈衣殼蛋白%豬γ-榦擾素%雙錶達載體%抗性篩選
    저원배병독2형%핵의각단백%저γ-간우소%쌍표체재체%항성사선
    通过PCR方法分别从含有猪圆环病毒2型(PCV-2)核衣壳蛋白(Cap)基因和猪γ-干扰素(PoIFN-γ)基因的重组克隆载体pMD18-PCV-2Cap和pMD18-PoIFN-y中扩增出Cap和PoIFN-γ的基因,将两基因亚克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,构建重组真核双表达载体pBud-IFNPCV.重组质粒转染BHK-21细胞后进行ZeocinTM抗性筛选建立细胞系,阳性细胞通过间接免疫荧光(IFA)和Western blot检测cap和PoIFN-y在BHK-21细胞中的表达.结果显示,试验中筛选出1株ZeocinTM抗性阳性BHK-21细胞,cap和PoIFN-γ均在该细胞中获得稳定高效表达,这将为猪圆环病毒病的防治提供新的方法.
    통과PCR방법분별종함유저원배병독2형(PCV-2)핵의각단백(Cap)기인화저γ-간우소(PoIFN-γ)기인적중조극륭재체pMD18-PCV-2Cap화pMD18-PoIFN-y중확증출Cap화PoIFN-γ적기인,장량기인아극륭도진핵표체재체pBudCE4.1중,구건중조진핵쌍표체재체pBud-IFNPCV.중조질립전염BHK-21세포후진행ZeocinTM항성사선건립세포계,양성세포통과간접면역형광(IFA)화Western blot검측cap화PoIFN-y재BHK-21세포중적표체.결과현시,시험중사선출1주ZeocinTM항성양성BHK-21세포,cap화PoIFN-γ균재해세포중획득은정고효표체,저장위저원배병독병적방치제공신적방법.
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