生命科学研究
生命科學研究
생명과학연구
LIFE SCIENCE RESEARCH
2011年
2期
111-114
,共4页
周煌%唐雄卓%闵璐%陈婷芳%彭夕洋%王琨%吴秀山%王跃群
週煌%唐雄卓%閔璐%陳婷芳%彭夕洋%王琨%吳秀山%王躍群
주황%당웅탁%민로%진정방%팽석양%왕곤%오수산%왕약군
CG8419%原核表达%多克隆抗体
CG8419%原覈錶達%多剋隆抗體
CG8419%원핵표체%다극륭항체
果蝇CG8419基因与脊椎动物中TRIM45基因为同源基因.以果蝇cDNA为模板通过PCR扩增出亲水性和特异性好的果蝇CG8419基因片段,将其克隆入表达载体PET-28a,构建出重组表达质粒PET-28a-CG8419.将重组质粒转化大肠杆茵Rosetta,经IPTG诱导出带His标签的重组融合蛋白.通过尿素洗涤包涵体并切胶回收纯化融合蛋白,然后再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.Western blot实验分别验证抗体的效价和特异性.果蝇胚胎抗体染色显示该基因在果蝇唾液腺中表达.
果蠅CG8419基因與脊椎動物中TRIM45基因為同源基因.以果蠅cDNA為模闆通過PCR擴增齣親水性和特異性好的果蠅CG8419基因片段,將其剋隆入錶達載體PET-28a,構建齣重組錶達質粒PET-28a-CG8419.將重組質粒轉化大腸桿茵Rosetta,經IPTG誘導齣帶His標籤的重組融閤蛋白.通過尿素洗滌包涵體併切膠迴收純化融閤蛋白,然後再免疫新西蘭大白兔製備多剋隆抗體.Western blot實驗分彆驗證抗體的效價和特異性.果蠅胚胎抗體染色顯示該基因在果蠅唾液腺中錶達.
과승CG8419기인여척추동물중TRIM45기인위동원기인.이과승cDNA위모판통과PCR확증출친수성화특이성호적과승CG8419기인편단,장기극륭입표체재체PET-28a,구건출중조표체질립PET-28a-CG8419.장중조질립전화대장간인Rosetta,경IPTG유도출대His표첨적중조융합단백.통과뇨소세조포함체병절효회수순화융합단백,연후재면역신서란대백토제비다극륭항체.Western blot실험분별험증항체적효개화특이성.과승배태항체염색현시해기인재과승타액선중표체.
