中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
8期
185-188
,共4页
郑念广%谭实勇%何玲%夏芳%高娟%罗满林
鄭唸廣%譚實勇%何玲%夏芳%高娟%囉滿林
정념엄%담실용%하령%하방%고연%라만림
副猪嗜血杆菌%抗体%间接酶联免疫吸附试验
副豬嗜血桿菌%抗體%間接酶聯免疫吸附試驗
부저기혈간균%항체%간접매련면역흡부시험
本试验采用121℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法.通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10 μg/mL,37℃包被2 h；封闭液选择含20 g/L脱脂奶粉的PBST,封闭30 min;血清的稀释度为1∶80；抗原抗体反应时间为45 min;酶标二抗稀释度为1∶12000,作用时间为30 min；底物显色时间为15 min.特异性、重复性和敏感性试验及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,对已知阴阳性血清的临床样本检测结果与国外ELISA试剂盒一致,可用于副猪嗜血杆菌的血清抗体检测和血清流行病学调查.
本試驗採用121℃高壓處理副豬嗜血桿菌4型和5型耐熱蛋白,混閤作為包被抗原,建立瞭檢測副豬嗜血桿菌抗體的間接ELISA方法.通過對試驗條件進行篩選優化,確定瞭最佳反應條件:抗原包被濃度為10 μg/mL,37℃包被2 h；封閉液選擇含20 g/L脫脂奶粉的PBST,封閉30 min;血清的稀釋度為1∶80；抗原抗體反應時間為45 min;酶標二抗稀釋度為1∶12000,作用時間為30 min；底物顯色時間為15 min.特異性、重複性和敏感性試驗及對200份送檢血清的檢測結果錶明,建立的間接ELISA方法特異性和重複性良好,敏感性比間接血凝試驗高,對已知陰暘性血清的臨床樣本檢測結果與國外ELISA試劑盒一緻,可用于副豬嗜血桿菌的血清抗體檢測和血清流行病學調查.
본시험채용121℃고압처리부저기혈간균4형화5형내열단백,혼합작위포피항원,건립료검측부저기혈간균항체적간접ELISA방법.통과대시험조건진행사선우화,학정료최가반응조건:항원포피농도위10 μg/mL,37℃포피2 h；봉폐액선택함20 g/L탈지내분적PBST,봉폐30 min;혈청적희석도위1∶80；항원항체반응시간위45 min;매표이항희석도위1∶12000,작용시간위30 min；저물현색시간위15 min.특이성、중복성화민감성시험급대200빈송검혈청적검측결과표명,건립적간접ELISA방법특이성화중복성량호,민감성비간접혈응시험고,대이지음양성혈청적림상양본검측결과여국외ELISA시제합일치,가용우부저기혈간균적혈청항체검측화혈청류행병학조사.
