中华脑科疾病与康复杂志(电子版)
中華腦科疾病與康複雜誌(電子版)
중화뇌과질병여강복잡지(전자판)
CHINESE JOURNAL OF BRAIN DI8SEASES AND REHABILITATIN(ELECTRONIC EDITION)
2011年
2期
123-132
,共10页
李合华%李彤%韩素改%刘传宝%魏丽红%张平%闫海清%常丽%贵永堃%禹萌
李閤華%李彤%韓素改%劉傳寶%魏麗紅%張平%閆海清%常麗%貴永堃%禹萌
리합화%리동%한소개%류전보%위려홍%장평%염해청%상려%귀영곤%우맹
原代细胞培养%转化生长因子β1%软脑膜,间皮细胞%结缔组织,生长因子%脑膜纤维化
原代細胞培養%轉化生長因子β1%軟腦膜,間皮細胞%結締組織,生長因子%腦膜纖維化
원대세포배양%전화생장인자β1%연뇌막,간피세포%결체조직,생장인자%뇌막섬유화
目的 观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠软脑膜间皮细胞(RLMCs)结缔组织生长因子( CTCF)表达的影响.方法 体外培养RLMCs,并将其分为4组:(1)0组(正常对照组):用无血清培养基(FSM)培养细胞;(2)1组:用含TGF-β11 ng/ml培养细胞;(3)2组:用含TGF-β1 2 ng/ml培养细胞;(4)3组:用含TGF-β14 ng/ml培养细胞;各组分别在TCF-β1刺激6、12及24 b后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定CTCF mRNA水平;蛋白免疫印迹(Westem blot)测定CTCF蛋白表达.数据以平均值±标准差(-χ±s)表示,各个浓度点组间比较采用单因素方差分析(One-way ANOVA),两两比较采用最小显著法(LSD)检验,以P<0.05有统计学意义.结果 在6、12及24 h分别以TCF-β1 1ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL处理,CTGF mRNA表达水平与对照组比较,差异有显著性(F6h=46.549、F12h= 287.098、F24h=109.202,P均<0.001),呈剂量依赖性,以TGF-β1处理12 h组CTGF mRNA表达差异明显.western blotting:正常对照组RLMCs细胞和不同浓度的TGF-β1刺激后均表达CTGF蛋白,在TGF-β1刺激6、12及24 h后,各组均随着浓度的增加而增加,差异有显著性(F6h= 52.988、F12h= 95.331、F24h=157.107,P均<0.001),呈剂量依赖性,以TGF-β1处理6h组CTGF蛋白表达差异明显.结论 TGF-β1能诱导RLMCs中CTGF通路激活.TGF-β1刺激RLMCs中CTGF mRNA和蛋白的表达,而且随浓度增加而显著.CTGF可能作为神经系统疾病中抑制脑膜纤维化的靶点而进一步研究.
目的 觀察轉化生長因子-β1(TGF-β1)對大鼠軟腦膜間皮細胞(RLMCs)結締組織生長因子( CTCF)錶達的影響.方法 體外培養RLMCs,併將其分為4組:(1)0組(正常對照組):用無血清培養基(FSM)培養細胞;(2)1組:用含TGF-β11 ng/ml培養細胞;(3)2組:用含TGF-β1 2 ng/ml培養細胞;(4)3組:用含TGF-β14 ng/ml培養細胞;各組分彆在TCF-β1刺激6、12及24 b後,採用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)方法測定CTCF mRNA水平;蛋白免疫印跡(Westem blot)測定CTCF蛋白錶達.數據以平均值±標準差(-χ±s)錶示,各箇濃度點組間比較採用單因素方差分析(One-way ANOVA),兩兩比較採用最小顯著法(LSD)檢驗,以P<0.05有統計學意義.結果 在6、12及24 h分彆以TCF-β1 1ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL處理,CTGF mRNA錶達水平與對照組比較,差異有顯著性(F6h=46.549、F12h= 287.098、F24h=109.202,P均<0.001),呈劑量依賴性,以TGF-β1處理12 h組CTGF mRNA錶達差異明顯.western blotting:正常對照組RLMCs細胞和不同濃度的TGF-β1刺激後均錶達CTGF蛋白,在TGF-β1刺激6、12及24 h後,各組均隨著濃度的增加而增加,差異有顯著性(F6h= 52.988、F12h= 95.331、F24h=157.107,P均<0.001),呈劑量依賴性,以TGF-β1處理6h組CTGF蛋白錶達差異明顯.結論 TGF-β1能誘導RLMCs中CTGF通路激活.TGF-β1刺激RLMCs中CTGF mRNA和蛋白的錶達,而且隨濃度增加而顯著.CTGF可能作為神經繫統疾病中抑製腦膜纖維化的靶點而進一步研究.
목적 관찰전화생장인자-β1(TGF-β1)대대서연뇌막간피세포(RLMCs)결체조직생장인자( CTCF)표체적영향.방법 체외배양RLMCs,병장기분위4조:(1)0조(정상대조조):용무혈청배양기(FSM)배양세포;(2)1조:용함TGF-β11 ng/ml배양세포;(3)2조:용함TGF-β1 2 ng/ml배양세포;(4)3조:용함TGF-β14 ng/ml배양세포;각조분별재TCF-β1자격6、12급24 b후,채용역전록-취합매련반응(RT-PCR)방법측정CTCF mRNA수평;단백면역인적(Westem blot)측정CTCF단백표체.수거이평균치±표준차(-χ±s)표시,각개농도점조간비교채용단인소방차분석(One-way ANOVA),량량비교채용최소현저법(LSD)검험,이P<0.05유통계학의의.결과 재6、12급24 h분별이TCF-β1 1ng/mL、2 ng/mL、4 ng/mL처리,CTGF mRNA표체수평여대조조비교,차이유현저성(F6h=46.549、F12h= 287.098、F24h=109.202,P균<0.001),정제량의뢰성,이TGF-β1처리12 h조CTGF mRNA표체차이명현.western blotting:정상대조조RLMCs세포화불동농도적TGF-β1자격후균표체CTGF단백,재TGF-β1자격6、12급24 h후,각조균수착농도적증가이증가,차이유현저성(F6h= 52.988、F12h= 95.331、F24h=157.107,P균<0.001),정제량의뢰성,이TGF-β1처리6h조CTGF단백표체차이명현.결론 TGF-β1능유도RLMCs중CTGF통로격활.TGF-β1자격RLMCs중CTGF mRNA화단백적표체,이차수농도증가이현저.CTGF가능작위신경계통질병중억제뇌막섬유화적파점이진일보연구.