微生物学杂志
微生物學雜誌
미생물학잡지
JOURNAL OF MICROBIOLOGY
2012年
2期
60-63
,共4页
姜晶%孙颖%刘红艳%牟玲%罗恩杰
薑晶%孫穎%劉紅豔%牟玲%囉恩傑
강정%손영%류홍염%모령%라은걸
重链可变医%引物设计%序列分析
重鏈可變醫%引物設計%序列分析
중련가변의%인물설계%서렬분석
针对抗体胚系基因数据库的数据不断更新和完善,为获得人全部免疫球蛋白(Ig)重链可变区基因,改进引物设计方法,自主设计针对可变区基因高度保守的框架区1(FR1)和框架区4(FR4)的引物,提取未经免疫的健康人外周血单个核细胞,通过RT-PCR扩增重链可变区基因.其DNA序列与GenBank数据库和IMGT/V-QUEST软件比对,序列分析符合人免疫球蛋白重链基本框架结构,为胚系基因重排产生的序列.多个克隆的测序结果对比分析显示了良好的多样性.获得的重链序列为研制基因工程抗体及构建噬菌体抗体库奠定了物质基础,也为扩增其他物种Ig可变区基因的引物提供新的设计思路.
針對抗體胚繫基因數據庫的數據不斷更新和完善,為穫得人全部免疫毬蛋白(Ig)重鏈可變區基因,改進引物設計方法,自主設計針對可變區基因高度保守的框架區1(FR1)和框架區4(FR4)的引物,提取未經免疫的健康人外週血單箇覈細胞,通過RT-PCR擴增重鏈可變區基因.其DNA序列與GenBank數據庫和IMGT/V-QUEST軟件比對,序列分析符閤人免疫毬蛋白重鏈基本框架結構,為胚繫基因重排產生的序列.多箇剋隆的測序結果對比分析顯示瞭良好的多樣性.穫得的重鏈序列為研製基因工程抗體及構建噬菌體抗體庫奠定瞭物質基礎,也為擴增其他物種Ig可變區基因的引物提供新的設計思路.
침대항체배계기인수거고적수거불단경신화완선,위획득인전부면역구단백(Ig)중련가변구기인,개진인물설계방법,자주설계침대가변구기인고도보수적광가구1(FR1)화광가구4(FR4)적인물,제취미경면역적건강인외주혈단개핵세포,통과RT-PCR확증중련가변구기인.기DNA서렬여GenBank수거고화IMGT/V-QUEST연건비대,서렬분석부합인면역구단백중련기본광가결구,위배계기인중배산생적서렬.다개극륭적측서결과대비분석현시료량호적다양성.획득적중련서렬위연제기인공정항체급구건서균체항체고전정료물질기출,야위확증기타물충Ig가변구기인적인물제공신적설계사로.
