人血管生成素-1和血管内皮生长因子VEGF165腺病毒载体构建
인혈관생성소-1화혈관내피생장인자VEGF165선병독재체구건
Cloning and construction of adenovirus expressing human angiopoietin-1 or vascular endothelial growth factor
  • 万方数据
    中国临床康复 중국림상강복
    CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
    2003年 3期 434-436，530 ,共4页

    周磊%张馥敏%杨志建%陆丽%丁兆丰%丁必森%哈团柱%李传富%高翔%马文珠

    주뢰%장복민%양지건%륙려%정조봉%정필삼%합단주%리전부%고상%마문주

    血管生成因子%内皮生长因子%成纤维细胞生长因子,碱性%腺病毒科%重组,遗传 血管生成因子%內皮生長因子%成纖維細胞生長因子,堿性%腺病毒科%重組,遺傳
    혈관생성인자%내피생장인자%성섬유세포생장인자,감성%선병독과%중조,유전
    目的:克隆人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor165,VEGF165)和血管生成素-1(angiopoiettin-1)的全长编码基因,构建表达该基因的复制缺陷型腺病毒载体Ad-Ang1和Ad-VEGF165.方法:通过RT-PCR方法克隆人VEGF165和Ang1全长编码基因.Ad-VEGF165和Ad-Ang1通过同源重组方法构建.将Ad-VEGF165和/或Ad-Ang1转染大鼠胚胎心脏成肌细胞(H9C2)24 h后,Western blot方法分析VEGF165和Ang1蛋白表达量;核酸电泳分析细胞基因组降解检测凋亡水平.结果:测序显示VEGF165序列与基因库序列相同;Ang1序列与基因库序列存在一个碱基的差异,但编码氨基酸无改变.VEGF165和Ang1蛋白表达分别为对照组的11.65倍和3.53倍.Ad-VEGF165和/或Ad-Ang1转染后的H9C2细胞对过氧化氢诱导的细胞凋亡具有明显的抵抗能力.结论:所构建的Ad-Ang1和Ad-VEGF165能有效转染心脏成肌细胞,表达出功能性目的蛋白,具有抗细胞凋亡作用.
    목적:극륭인혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor165,VEGF165)화혈관생성소-1(angiopoiettin-1)적전장편마기인,구건표체해기인적복제결함형선병독재체Ad-Ang1화Ad-VEGF165.방법:통과RT-PCR방법극륭인VEGF165화Ang1전장편마기인.Ad-VEGF165화Ad-Ang1통과동원중조방법구건.장Ad-VEGF165화/혹Ad-Ang1전염대서배태심장성기세포(H9C2)24 h후,Western blot방법분석VEGF165화Ang1단백표체량;핵산전영분석세포기인조강해검측조망수평.결과:측서현시VEGF165서렬여기인고서렬상동;Ang1서렬여기인고서렬존재일개감기적차이,단편마안기산무개변.VEGF165화Ang1단백표체분별위대조조적11.65배화3.53배.Ad-VEGF165화/혹Ad-Ang1전염후적H9C2세포대과양화경유도적세포조망구유명현적저항능력.결론:소구건적Ad-Ang1화Ad-VEGF165능유효전염심장성기세포,표체출공능성목적단백,구유항세포조망작용.
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