现代免疫学
現代免疫學
현대면역학
CURRENT IMMUNOLOGY
2006年
4期
289-292
,共4页
谢应国%吴秀芳%武素琴%罗德炎%张松乐%王希良
謝應國%吳秀芳%武素琴%囉德炎%張鬆樂%王希良
사응국%오수방%무소금%라덕염%장송악%왕희량
炭疽杆菌%中性蛋白酶%蛋白表达%纯化
炭疽桿菌%中性蛋白酶%蛋白錶達%純化
탄저간균%중성단백매%단백표체%순화
构建表达炭疽杆菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白(位于248～532氨基酸),并对其免疫效果进行研究;设计引物采用PCR法自炭疽杆菌扩增中性蛋白酶部分片段N,T-A克隆后构建原核表达质粒pET28a(+)-N,通过Western blot检测重组蛋白的免疫原性.以Al(OH)3为佐剂皮下注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA方法测血清总IgG水平,MTT比色法测定脾T淋巴细胞增殖,采用流式分选法对脾T淋巴细胞亚群分类;Western blot显示重组蛋白具有免疫原性,rN免疫BALB/c小鼠后,ELISA检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生;T淋巴细胞亚群试验表明,重组N蛋白以诱发Th2型免疫反应为主;MTT试验表明,rN蛋白对小鼠脾细胞在体外有促进生长和增殖能力,说明该重组蛋白具有生物学活性.纯化的rN可诱导高水平的抗体反应,为进一步的功能研究奠定了基础.
構建錶達炭疽桿菌中性蛋白酶基因部分片段N蛋白(位于248～532氨基痠),併對其免疫效果進行研究;設計引物採用PCR法自炭疽桿菌擴增中性蛋白酶部分片段N,T-A剋隆後構建原覈錶達質粒pET28a(+)-N,通過Western blot檢測重組蛋白的免疫原性.以Al(OH)3為佐劑皮下註射免疫BALB/c小鼠,用ELISA方法測血清總IgG水平,MTT比色法測定脾T淋巴細胞增殖,採用流式分選法對脾T淋巴細胞亞群分類;Western blot顯示重組蛋白具有免疫原性,rN免疫BALB/c小鼠後,ELISA檢測到免疫鼠體內有特異性抗體產生;T淋巴細胞亞群試驗錶明,重組N蛋白以誘髮Th2型免疫反應為主;MTT試驗錶明,rN蛋白對小鼠脾細胞在體外有促進生長和增殖能力,說明該重組蛋白具有生物學活性.純化的rN可誘導高水平的抗體反應,為進一步的功能研究奠定瞭基礎.
구건표체탄저간균중성단백매기인부분편단N단백(위우248～532안기산),병대기면역효과진행연구;설계인물채용PCR법자탄저간균확증중성단백매부분편단N,T-A극륭후구건원핵표체질립pET28a(+)-N,통과Western blot검측중조단백적면역원성.이Al(OH)3위좌제피하주사면역BALB/c소서,용ELISA방법측혈청총IgG수평,MTT비색법측정비T림파세포증식,채용류식분선법대비T림파세포아군분류;Western blot현시중조단백구유면역원성,rN면역BALB/c소서후,ELISA검측도면역서체내유특이성항체산생;T림파세포아군시험표명,중조N단백이유발Th2형면역반응위주;MTT시험표명,rN단백대소서비세포재체외유촉진생장화증식능력,설명해중조단백구유생물학활성.순화적rN가유도고수평적항체반응,위진일보적공능연구전정료기출.
