武汉植物学研究
武漢植物學研究
무한식물학연구
JOURNAL OF WUHAN BOTANICAL RESEARCH
2007年
2期
118-122
,共5页
双价基因%表达载体%抗虫性%活性蛋白
雙價基因%錶達載體%抗蟲性%活性蛋白
쌍개기인%표체재체%항충성%활성단백
将人工合成的、密码子优化后的透明颤菌血红蛋白基因与人工合成的GFMcryIA基因构建成双价基因植物高效表达载体PGBI4ASVHBBt,vgbM基因表达盒中含2个增强子的35S启动子、Ω前导序列、Kozak序列、多联终止密码子及Nos终止子;Bt基因表达盒中,除含有以上提高转录和翻译的调控元件外,还包含有正确切割、加工序列、Poly(A)信号序列.利用根癌农杆菌介导转化烟草,获得了转基因植株; PCR及Southern blot检测,证实了双价基因在烟草基因组中的整合;Western blot检测证实了vgbM基因在转基因烟草中的表达;杀虫实验表明GFMcryIA基因也表达出活性毒蛋白.
將人工閤成的、密碼子優化後的透明顫菌血紅蛋白基因與人工閤成的GFMcryIA基因構建成雙價基因植物高效錶達載體PGBI4ASVHBBt,vgbM基因錶達盒中含2箇增彊子的35S啟動子、Ω前導序列、Kozak序列、多聯終止密碼子及Nos終止子;Bt基因錶達盒中,除含有以上提高轉錄和翻譯的調控元件外,還包含有正確切割、加工序列、Poly(A)信號序列.利用根癌農桿菌介導轉化煙草,穫得瞭轉基因植株; PCR及Southern blot檢測,證實瞭雙價基因在煙草基因組中的整閤;Western blot檢測證實瞭vgbM基因在轉基因煙草中的錶達;殺蟲實驗錶明GFMcryIA基因也錶達齣活性毒蛋白.
장인공합성적、밀마자우화후적투명전균혈홍단백기인여인공합성적GFMcryIA기인구건성쌍개기인식물고효표체재체PGBI4ASVHBBt,vgbM기인표체합중함2개증강자적35S계동자、Ω전도서렬、Kozak서렬、다련종지밀마자급Nos종지자;Bt기인표체합중,제함유이상제고전록화번역적조공원건외,환포함유정학절할、가공서렬、Poly(A)신호서렬.이용근암농간균개도전화연초,획득료전기인식주; PCR급Southern blot검측,증실료쌍개기인재연초기인조중적정합;Western blot검측증실료vgbM기인재전기인연초중적표체;살충실험표명GFMcryIA기인야표체출활성독단백.
