食品与发酵工业
食品與髮酵工業
식품여발효공업
FOOD AND FERMENTATION INDUSTRIES
2007年
3期
1-4
,共4页
王艳萍%崔艳艳%左志晗%郭金体%张阳
王豔萍%崔豔豔%左誌晗%郭金體%張暘
왕염평%최염염%좌지함%곽금체%장양
棒状链霉菌%克拉维酸%lat基因%基因突变
棒狀鏈黴菌%剋拉維痠%lat基因%基因突變
봉상련매균%극랍유산%lat기인%기인돌변
以棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus NRRL 3585的染色体为模板扩增得到1条1.77kb的lat基因片段,并将其用于构建重组质粒pKCLES.将pKCLES由E.coli ET12567接合转移至S.clavuligerus中.重组质粒pKCLES与S.clavuligerus染色体中野生型lat基因发生同源交换,从而获得了带有阿泊拉抗性的突变菌株.对S.clavuligerus NRRL 3585以及lat突变菌株的基因组进行PCR验证,且测定了这2种菌株的产头酶素C的能力.结果均表明,突变菌株中的lat基因中插入了含有阿泊拉抗性的pKC1139片段而遭到了破坏.另外,以HPLC法测定了这2种菌株在不同培养时间(72h和96h)下的克拉维酸的产量,结果显示,lat突变菌株的克拉维酸产量最高能达到其原始菌株的2.3倍.
以棒狀鏈黴菌Streptomyces clavuligerus NRRL 3585的染色體為模闆擴增得到1條1.77kb的lat基因片段,併將其用于構建重組質粒pKCLES.將pKCLES由E.coli ET12567接閤轉移至S.clavuligerus中.重組質粒pKCLES與S.clavuligerus染色體中野生型lat基因髮生同源交換,從而穫得瞭帶有阿泊拉抗性的突變菌株.對S.clavuligerus NRRL 3585以及lat突變菌株的基因組進行PCR驗證,且測定瞭這2種菌株的產頭酶素C的能力.結果均錶明,突變菌株中的lat基因中插入瞭含有阿泊拉抗性的pKC1139片段而遭到瞭破壞.另外,以HPLC法測定瞭這2種菌株在不同培養時間(72h和96h)下的剋拉維痠的產量,結果顯示,lat突變菌株的剋拉維痠產量最高能達到其原始菌株的2.3倍.
이봉상련매균Streptomyces clavuligerus NRRL 3585적염색체위모판확증득도1조1.77kb적lat기인편단,병장기용우구건중조질립pKCLES.장pKCLES유E.coli ET12567접합전이지S.clavuligerus중.중조질립pKCLES여S.clavuligerus염색체중야생형lat기인발생동원교환,종이획득료대유아박랍항성적돌변균주.대S.clavuligerus NRRL 3585이급lat돌변균주적기인조진행PCR험증,차측정료저2충균주적산두매소C적능력.결과균표명,돌변균주중적lat기인중삽입료함유아박랍항성적pKC1139편단이조도료파배.령외,이HPLC법측정료저2충균주재불동배양시간(72h화96h)하적극랍유산적산량,결과현시,lat돌변균주적극랍유산산량최고능체도기원시균주적2.3배.
