广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
6期
870-872
,共3页
裴静娴%刘城%童锴%胡英芳%王月刚%郭寿贵%吴平生
裴靜嫻%劉城%童鍇%鬍英芳%王月剛%郭壽貴%吳平生
배정한%류성%동개%호영방%왕월강%곽수귀%오평생
低氧诱导因子1α%人骨髓间充质干细胞%5-氮胞苷%心肌样细胞
低氧誘導因子1α%人骨髓間充質榦細胞%5-氮胞苷%心肌樣細胞
저양유도인자1α%인골수간충질간세포%5-담포감%심기양세포
目的 探讨突变型低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因对体外诱导环境人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)分化成心肌样细胞(cardiomyocyte-like)过程中的影响.方法 重组腺病毒Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402和Ad-HIF-1α564/803以最佳转染复数转染体外5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导的hMSCs,诱导培养后第4周,提取细胞浆蛋白,一步法酶联免疫分析检测心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量;Western blot测定HIF-1α及VEGF蛋白表达水平.结果 5-aza诱导hMSCs第4周cTnI值:Ad-HIF-1αnature(0.426 ±0.001)、Ad-HIF-1α564(0.424±0.002)、Ad-HIF-1α564/402 (0.428±0.005)、Ad-HIF-1α564/803(0.441±0.003)、空白组(0.411±0.010)、Ad-LacZ(0.410±0.016),各实验组有显著性差异(P<0.05);Ad-HIF-1α564/803 组cTnI表达高于Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402三组(P<0.05).Western blot结果显示Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402和Ad-HIF-1α564/803 四组HIF-1α及VEGF蛋白表达水平均较Ad-LacZ组高,有显著性差异(P=0.000),但Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402和Ad-HIF-1α564/803 与Ad-HIF-1αnature相比,各组间两种蛋白表达差异均无显著性(P>0.05).结论 野生型HIF-1α基因及突变型能促进5-aza诱导的hMSCs向心肌样细胞转化,为HIF-1α及hMSCs 在心肌再生中的联合应用奠定了实验基础.
目的 探討突變型低氧誘導因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因對體外誘導環境人骨髓間充質榦細胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)分化成心肌樣細胞(cardiomyocyte-like)過程中的影響.方法 重組腺病毒Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402和Ad-HIF-1α564/803以最佳轉染複數轉染體外5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)誘導的hMSCs,誘導培養後第4週,提取細胞漿蛋白,一步法酶聯免疫分析檢測心肌肌鈣蛋白I(cTnI)含量;Western blot測定HIF-1α及VEGF蛋白錶達水平.結果 5-aza誘導hMSCs第4週cTnI值:Ad-HIF-1αnature(0.426 ±0.001)、Ad-HIF-1α564(0.424±0.002)、Ad-HIF-1α564/402 (0.428±0.005)、Ad-HIF-1α564/803(0.441±0.003)、空白組(0.411±0.010)、Ad-LacZ(0.410±0.016),各實驗組有顯著性差異(P<0.05);Ad-HIF-1α564/803 組cTnI錶達高于Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402三組(P<0.05).Western blot結果顯示Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402和Ad-HIF-1α564/803 四組HIF-1α及VEGF蛋白錶達水平均較Ad-LacZ組高,有顯著性差異(P=0.000),但Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402和Ad-HIF-1α564/803 與Ad-HIF-1αnature相比,各組間兩種蛋白錶達差異均無顯著性(P>0.05).結論 野生型HIF-1α基因及突變型能促進5-aza誘導的hMSCs嚮心肌樣細胞轉化,為HIF-1α及hMSCs 在心肌再生中的聯閤應用奠定瞭實驗基礎.
목적 탐토돌변형저양유도인자1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)기인대체외유도배경인골수간충질간세포(human mesenchymal stem cells,hMSCs)분화성심기양세포(cardiomyocyte-like)과정중적영향.방법 중조선병독Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402화Ad-HIF-1α564/803이최가전염복수전염체외5-담포감(5-azacytidine,5-aza)유도적hMSCs,유도배양후제4주,제취세포장단백,일보법매련면역분석검측심기기개단백I(cTnI)함량;Western blot측정HIF-1α급VEGF단백표체수평.결과 5-aza유도hMSCs제4주cTnI치:Ad-HIF-1αnature(0.426 ±0.001)、Ad-HIF-1α564(0.424±0.002)、Ad-HIF-1α564/402 (0.428±0.005)、Ad-HIF-1α564/803(0.441±0.003)、공백조(0.411±0.010)、Ad-LacZ(0.410±0.016),각실험조유현저성차이(P<0.05);Ad-HIF-1α564/803 조cTnI표체고우Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402삼조(P<0.05).Western blot결과현시Ad-HIF-1αnature、Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402화Ad-HIF-1α564/803 사조HIF-1α급VEGF단백표체수평균교Ad-LacZ조고,유현저성차이(P=0.000),단Ad-HIF-1α564、Ad-HIF-1α564/402화Ad-HIF-1α564/803 여Ad-HIF-1αnature상비,각조간량충단백표체차이균무현저성(P>0.05).결론 야생형HIF-1α기인급돌변형능촉진5-aza유도적hMSCs향심기양세포전화,위HIF-1α급hMSCs 재심기재생중적연합응용전정료실험기출.
