CAJ | 학술논문

目的:Rb94 基因转染裸鼠肺腺癌皮下移植瘤,观察Rb94 基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及对鞘氨醇激酶(sphingosine kinase , SphK)表达的影响.方法:收集一定数量的对数生长期A549 细胞,生理盐水重悬后每只裸鼠右后肢皮下接种5×106/0.1mL A549 细胞悬液,待瘤体生长至一定体积后随机分为4 组,分别为对照组、空载体组、脂质体组、转染Rb94 基因组;每组裸鼠瘤体内分别注射PBS 、质粒pIRES 、脂质体(lipofectamine)、质粒pIRES-Rb94 ,观察肿瘤生长情况并检测抑瘤率;裸鼠脱颈处死后,采用Western bolt 法检测瘤组织中Rb94 基因表达情况,并采用实时RT-PCR 和免疫荧光法(immunofluorescence , IF)观察其对裸鼠肺腺癌皮下移植瘤中SphK 表达的影响.结果:对照组及转染组裸鼠在接种部位均有移植瘤生成;与空白对照组、脂质体组、空载体组相比,转染Rb94 基因组的裸鼠移植瘤的生长速度明显减慢,肿瘤的体积较小,重量较轻,有显著性差异(P<0.05),而3 个对照组之间,无显著性差异(P>0.05);空白对照组、空载体组、脂质体组抑瘤率分别为0 、11.78%、7.86%,而转染Rb94 基因组平均抑瘤率高达51.99%,肿瘤生长明显抑制; SphK1 在mRNA 和蛋白水平表达下调而SphK2 表达上调.结论: Rb94 基因成功转染裸鼠肺腺癌皮下移植瘤; Rb94 基因抑制裸鼠皮下肿瘤生长; Rb94 基因抑制SphK1 的表达,增强SphK2 的表达.
목적:Rb94 기인전염라서폐선암피하이식류,관찰Rb94 기인대인폐선암라서이식류적억제작용급대초안순격매(sphingosine kinase , SphK)표체적영향.방법:수집일정수량적대수생장기A549 세포,생리염수중현후매지라서우후지피하접충5×106/0.1mL A549 세포현액,대류체생장지일정체적후수궤분위4 조,분별위대조조、공재체조、지질체조、전염Rb94 기인조;매조라서류체내분별주사PBS 、질립pIRES 、지질체(lipofectamine)、질립pIRES-Rb94 ,관찰종류생장정황병검측억류솔;라서탈경처사후,채용Western bolt 법검측류조직중Rb94 기인표체정황,병채용실시RT-PCR 화면역형광법(immunofluorescence , IF)관찰기대라서폐선암피하이식류중SphK 표체적영향.결과:대조조급전염조라서재접충부위균유이식류생성;여공백대조조、지질체조、공재체조상비,전염Rb94 기인조적라서이식류적생장속도명현감만,종류적체적교소,중량교경,유현저성차이(P<0.05),이3 개대조조지간,무현저성차이(P>0.05);공백대조조、공재체조、지질체조억류솔분별위0 、11.78%、7.86%,이전염Rb94 기인조평균억류솔고체51.99%,종류생장명현억제; SphK1 재mRNA 화단백수평표체하조이SphK2 표체상조.결론: Rb94 기인성공전염라서폐선암피하이식류; Rb94 기인억제라서피하종류생장; Rb94 기인억제SphK1 적표체,증강SphK2 적표체.