解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
5期
635-639
,共5页
陈学秋%戴纪男%刘承杏%边立功%郭家智%孙俊%桂莉%陆地
陳學鞦%戴紀男%劉承杏%邊立功%郭傢智%孫俊%桂莉%陸地
진학추%대기남%류승행%변립공%곽가지%손준%계리%륙지
MG63细胞%17β-雌二醇%高同型半胱氨酸%活性氧簇%荧光探针%Hoechst%33342/%PI核双染法%免疫印迹法
MG63細胞%17β-雌二醇%高同型半胱氨痠%活性氧簇%熒光探針%Hoechst%33342/%PI覈雙染法%免疫印跡法
MG63세포%17β-자이순%고동형반광안산%활성양족%형광탐침%Hoechst%33342/%PI핵쌍염법%면역인적법
目的 探讨17β-雌二醇(17β-E2)对高同型半胱氨酸(HHcy)诱导人成骨肉瘤MG63细胞损伤的保护作用及其分子机制.方法 体外培养的人成骨肉瘤MG63细胞经17β-E2干预后,再以不同浓度和(或)不同时间的HHcy处理后,采用2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸盐(H2DCFDA)探针检测细胞内活性氧(ROS)水平变化;通过Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)核双染法观察计数凋亡和坏死细胞;采用免疫印迹法检测促凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达变化.结果 1.17β-E2可明显抑制HHcy诱导的MG63细胞内ROS的增加,抑制效果随剂量和时间而增强; 2.17β-E2可明显下调促凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达,对抗HHcy诱导的MG63细胞的凋亡和(或)坏死.结论 17β-E2可通过抑制ROS的产生,下调凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达而增强MG63细胞抗HHcy所诱导的氧化损伤作用.
目的 探討17β-雌二醇(17β-E2)對高同型半胱氨痠(HHcy)誘導人成骨肉瘤MG63細胞損傷的保護作用及其分子機製.方法 體外培養的人成骨肉瘤MG63細胞經17β-E2榦預後,再以不同濃度和(或)不同時間的HHcy處理後,採用2′,7′-二氯二氫熒光素二乙痠鹽(H2DCFDA)探針檢測細胞內活性氧(ROS)水平變化;通過Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)覈雙染法觀察計數凋亡和壞死細胞;採用免疫印跡法檢測促凋亡相關蛋白Caspase-3和Bax的錶達變化.結果 1.17β-E2可明顯抑製HHcy誘導的MG63細胞內ROS的增加,抑製效果隨劑量和時間而增彊; 2.17β-E2可明顯下調促凋亡相關蛋白Caspase-3和Bax的錶達,對抗HHcy誘導的MG63細胞的凋亡和(或)壞死.結論 17β-E2可通過抑製ROS的產生,下調凋亡相關蛋白Caspase-3和Bax的錶達而增彊MG63細胞抗HHcy所誘導的氧化損傷作用.
목적 탐토17β-자이순(17β-E2)대고동형반광안산(HHcy)유도인성골육류MG63세포손상적보호작용급기분자궤제.방법 체외배양적인성골육류MG63세포경17β-E2간예후,재이불동농도화(혹)불동시간적HHcy처리후,채용2′,7′-이록이경형광소이을산염(H2DCFDA)탐침검측세포내활성양(ROS)수평변화;통과Hoechst 33342/전화병정(PI)핵쌍염법관찰계수조망화배사세포;채용면역인적법검측촉조망상관단백Caspase-3화Bax적표체변화.결과 1.17β-E2가명현억제HHcy유도적MG63세포내ROS적증가,억제효과수제량화시간이증강; 2.17β-E2가명현하조촉조망상관단백Caspase-3화Bax적표체,대항HHcy유도적MG63세포적조망화(혹)배사.결론 17β-E2가통과억제ROS적산생,하조조망상관단백Caspase-3화Bax적표체이증강MG63세포항HHcy소유도적양화손상작용.
