浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2011年
5期
473-478
,共6页
孙静%魏永伟%章晓栋%于涟
孫靜%魏永偉%章曉棟%于漣
손정%위영위%장효동%우련
传染性法氏囊病病毒%VP2基因%定点突变%突变体%Vero细胞系
傳染性法氏囊病病毒%VP2基因%定點突變%突變體%Vero細胞繫
전염성법씨낭병병독%VP2기인%정점돌변%돌변체%Vero세포계
根据传染性法氏囊病病毒( IBDV)HZ2株VP2基因序列设计1对引物,将该基因成功克隆到真核表达载体pDsRed2-N1中,构建重组质粒pDsRed2-N1-VP2(简称PVP2)；以PVP2作为过渡载体,运用PCR定点突变技术,对第279位点和第284位点的氨基酸残基分别或同时进行突变,共构建P279、P284和PDA 3株突变体；在此基础上构建能稳定表达HZ2株IBDV及其突变体VP2蛋白的Vero细胞系,间接免疫荧光试验检测表明,Vero细胞系中IBDV VP2蛋白已成功表达.这为进一步深入研究IBDV毒力及抗原变异致病机制奠定了基础；此外,利用定点突变技术改造VP2蛋白,建立不同毒力的突变体,在探求高效、廉价的IBDV DNA疫苗上也有广阔的应用前景和重要意义.
根據傳染性法氏囊病病毒( IBDV)HZ2株VP2基因序列設計1對引物,將該基因成功剋隆到真覈錶達載體pDsRed2-N1中,構建重組質粒pDsRed2-N1-VP2(簡稱PVP2)；以PVP2作為過渡載體,運用PCR定點突變技術,對第279位點和第284位點的氨基痠殘基分彆或同時進行突變,共構建P279、P284和PDA 3株突變體；在此基礎上構建能穩定錶達HZ2株IBDV及其突變體VP2蛋白的Vero細胞繫,間接免疫熒光試驗檢測錶明,Vero細胞繫中IBDV VP2蛋白已成功錶達.這為進一步深入研究IBDV毒力及抗原變異緻病機製奠定瞭基礎；此外,利用定點突變技術改造VP2蛋白,建立不同毒力的突變體,在探求高效、廉價的IBDV DNA疫苗上也有廣闊的應用前景和重要意義.
근거전염성법씨낭병병독( IBDV)HZ2주VP2기인서렬설계1대인물,장해기인성공극륭도진핵표체재체pDsRed2-N1중,구건중조질립pDsRed2-N1-VP2(간칭PVP2)；이PVP2작위과도재체,운용PCR정점돌변기술,대제279위점화제284위점적안기산잔기분별혹동시진행돌변,공구건P279、P284화PDA 3주돌변체；재차기출상구건능은정표체HZ2주IBDV급기돌변체VP2단백적Vero세포계,간접면역형광시험검측표명,Vero세포계중IBDV VP2단백이성공표체.저위진일보심입연구IBDV독력급항원변이치병궤제전정료기출；차외,이용정점돌변기술개조VP2단백,건립불동독력적돌변체,재탐구고효、렴개적IBDV DNA역묘상야유엄활적응용전경화중요의의.
