农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2003年
3期
280-284
,共5页
林爱星%周云%胡宏宇%侯建%安晓荣%陈永福
林愛星%週雲%鬍宏宇%侯建%安曉榮%陳永福
림애성%주운%호굉우%후건%안효영%진영복
位置效应%β-乳球蛋白(BLG)基因%基质附着区序列(MARs)%转基因小鼠%法氏囊病毒A片段%遗传%拷贝依赖性表达%乳腺
位置效應%β-乳毬蛋白(BLG)基因%基質附著區序列(MARs)%轉基因小鼠%法氏囊病毒A片段%遺傳%拷貝依賴性錶達%乳腺
위치효응%β-유구단백(BLG)기인%기질부착구서렬(MARs)%전기인소서%법씨낭병독A편단%유전%고패의뢰성표체%유선
将法氏囊病毒(IBDV)A片段定向连于乳腺特异性表达载体p7GMB53,用于转基因实验,用PCR和Southern杂交对阳性小鼠及其后代进行检测.共注射了879枚小鼠受精卵,移植受体26只,产仔39只.经PCR检测阳性6只(其中2只死胎),Southern杂交检测确定了2只阳性小鼠(1公1母).外源基因整合的拷贝数分别为3拷贝(公)和9拷贝(母).将两只阳性小鼠进行了传代,实验表明二者分别为种系纯合体及种系嵌合体.ELISA及Westernblot检测认为阳性母鼠表达了IBDV衣壳蛋白.初步验证了先前构建的含基质附着区序列(MARs)的乳腺表达载体能克服转基因的位置效应,实现转入目的基因的表达,提高乳腺反应器的制备效率.
將法氏囊病毒(IBDV)A片段定嚮連于乳腺特異性錶達載體p7GMB53,用于轉基因實驗,用PCR和Southern雜交對暘性小鼠及其後代進行檢測.共註射瞭879枚小鼠受精卵,移植受體26隻,產仔39隻.經PCR檢測暘性6隻(其中2隻死胎),Southern雜交檢測確定瞭2隻暘性小鼠(1公1母).外源基因整閤的拷貝數分彆為3拷貝(公)和9拷貝(母).將兩隻暘性小鼠進行瞭傳代,實驗錶明二者分彆為種繫純閤體及種繫嵌閤體.ELISA及Westernblot檢測認為暘性母鼠錶達瞭IBDV衣殼蛋白.初步驗證瞭先前構建的含基質附著區序列(MARs)的乳腺錶達載體能剋服轉基因的位置效應,實現轉入目的基因的錶達,提高乳腺反應器的製備效率.
장법씨낭병독(IBDV)A편단정향련우유선특이성표체재체p7GMB53,용우전기인실험,용PCR화Southern잡교대양성소서급기후대진행검측.공주사료879매소서수정란,이식수체26지,산자39지.경PCR검측양성6지(기중2지사태),Southern잡교검측학정료2지양성소서(1공1모).외원기인정합적고패수분별위3고패(공)화9고패(모).장량지양성소서진행료전대,실험표명이자분별위충계순합체급충계감합체.ELISA급Westernblot검측인위양성모서표체료IBDV의각단백.초보험증료선전구건적함기질부착구서렬(MARs)적유선표체재체능극복전기인적위치효응,실현전입목적기인적표체,제고유선반응기적제비효솔.
