四川大学学报（医学版）
四川大學學報（醫學版）
사천대학학보（의학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE EDITION)
2006年
3期
344-348
,共5页
王国庆%王永生%王瑞%吴杨%杜小波%徐建容%刁鹏
王國慶%王永生%王瑞%吳楊%杜小波%徐建容%刁鵬
왕국경%왕영생%왕서%오양%두소파%서건용%조붕
防御素%疫苗%血管生成
防禦素%疫苗%血管生成
방어소%역묘%혈관생성
目的构建β防御素2(BD2)融合血管内皮钙粘附素(VE-Cadherin)胞外段重组质粒,以期探讨其免疫后抗肿瘤血管生成作用.方法 PCR扩增成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段.以连接肽连接成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段,通过重叠PCR构建融合分子.将所得三种片段插入到pSecTag2B真核表达质粒.转染CT26肿瘤细胞,RT-PCR检测其表达.取转染COS细胞后的上清液做趋化实验,检测融合分子对树突状细胞(DC)的趋化作用.所得质粒经肌肉注射免疫小鼠后,皮下植入包裹CT26肿瘤细胞的藻酸盐微球,检测血管生成情况.结果测序证实三种质粒构建正确,能在真核细胞中顺利表达.BD2融合重组质粒和未融合的BD2质粒转染细胞后的上清液趋化DC的能力相近( P >0.05).与其余各组质粒免疫相比,融合重组质粒免疫后能够显著抑制藻酸盐微球中肿瘤细胞诱导的血管生成( P <0.01).结论 BD2融合血管生成相关分子后的重组质粒免疫动物后能在体内有效地打破机体对肿瘤新生血管的免疫耐受.
目的構建β防禦素2(BD2)融閤血管內皮鈣粘附素(VE-Cadherin)胞外段重組質粒,以期探討其免疫後抗腫瘤血管生成作用.方法 PCR擴增成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段.以連接肽連接成熟BD2片段和VE-Cadherin胞外段,通過重疊PCR構建融閤分子.將所得三種片段插入到pSecTag2B真覈錶達質粒.轉染CT26腫瘤細胞,RT-PCR檢測其錶達.取轉染COS細胞後的上清液做趨化實驗,檢測融閤分子對樹突狀細胞(DC)的趨化作用.所得質粒經肌肉註射免疫小鼠後,皮下植入包裹CT26腫瘤細胞的藻痠鹽微毬,檢測血管生成情況.結果測序證實三種質粒構建正確,能在真覈細胞中順利錶達.BD2融閤重組質粒和未融閤的BD2質粒轉染細胞後的上清液趨化DC的能力相近( P >0.05).與其餘各組質粒免疫相比,融閤重組質粒免疫後能夠顯著抑製藻痠鹽微毬中腫瘤細胞誘導的血管生成( P <0.01).結論 BD2融閤血管生成相關分子後的重組質粒免疫動物後能在體內有效地打破機體對腫瘤新生血管的免疫耐受.
목적구건β방어소2(BD2)융합혈관내피개점부소(VE-Cadherin)포외단중조질립,이기탐토기면역후항종류혈관생성작용.방법 PCR확증성숙BD2편단화VE-Cadherin포외단.이련접태련접성숙BD2편단화VE-Cadherin포외단,통과중첩PCR구건융합분자.장소득삼충편단삽입도pSecTag2B진핵표체질립.전염CT26종류세포,RT-PCR검측기표체.취전염COS세포후적상청액주추화실험,검측융합분자대수돌상세포(DC)적추화작용.소득질립경기육주사면역소서후,피하식입포과CT26종류세포적조산염미구,검측혈관생성정황.결과측서증실삼충질립구건정학,능재진핵세포중순리표체.BD2융합중조질립화미융합적BD2질립전염세포후적상청액추화DC적능력상근( P >0.05).여기여각조질립면역상비,융합중조질립면역후능구현저억제조산염미구중종류세포유도적혈관생성( P <0.01).결론 BD2융합혈관생성상관분자후적중조질립면역동물후능재체내유효지타파궤체대종류신생혈관적면역내수.
