实用临床医药杂志
實用臨床醫藥雜誌
실용림상의약잡지
JOURNAL OF JIANGSU CLINICAL MEDICINE
2009年
7期
46-50
,共5页
严慧深%吴小涛%王运涛%邵建树%曹烨%鲍军平
嚴慧深%吳小濤%王運濤%邵建樹%曹燁%鮑軍平
엄혜심%오소도%왕운도%소건수%조엽%포군평
椎间盘退变%骨髓间充质干细胞%干细胞移植%绿色荧光蛋白
椎間盤退變%骨髓間充質榦細胞%榦細胞移植%綠色熒光蛋白
추간반퇴변%골수간충질간세포%간세포이식%록색형광단백
目的 探讨绿色荧光蛋白(GFP)示踪时效及GFP标记的骨髓间充质干细胞(MSCs)在移植后参与退变修复过程中的细胞增殖情况.方法 使用针吸髓核法建立兔的椎间盘退变模型,体外培养MSCs,并用含有绿色荧光蛋白标记的腺病毒载体(Adeno-XTM-GFP)转染,成为GFP标记的MSCs(GFP-MSCs),于造模2周后植入造模的椎间盘内.在移植后第2、4、6、8周用激光共聚焦显微成像技术,观察MSCs的增殖情况,对比GFP本身荧光和免疫荧光的示踪时间.结果 非免疫荧光组GFP本身荧光强度能够持续到4周,后较微弱甚至难以辨别;免疫荧光组用FITC荧光二抗标记的GFP-MSCs在8周内都能够持续稳定的显现荧光,4个时间点GFP-MSCs的阳性率的可信区间分别是:2周(14.64±2.05)%;4周(21.85±2.45)%;6周(31.03±4.03)%;8周(36.37±4.42)%.结论 GFP-MSCs在椎间盘微环境中能够稳定增殖.若示踪研究需要持续超过4周,则虚对GFP行免疫荧光染色,可以使有效示踪时间持续至少8周.
目的 探討綠色熒光蛋白(GFP)示蹤時效及GFP標記的骨髓間充質榦細胞(MSCs)在移植後參與退變脩複過程中的細胞增殖情況.方法 使用針吸髓覈法建立兔的椎間盤退變模型,體外培養MSCs,併用含有綠色熒光蛋白標記的腺病毒載體(Adeno-XTM-GFP)轉染,成為GFP標記的MSCs(GFP-MSCs),于造模2週後植入造模的椎間盤內.在移植後第2、4、6、8週用激光共聚焦顯微成像技術,觀察MSCs的增殖情況,對比GFP本身熒光和免疫熒光的示蹤時間.結果 非免疫熒光組GFP本身熒光彊度能夠持續到4週,後較微弱甚至難以辨彆;免疫熒光組用FITC熒光二抗標記的GFP-MSCs在8週內都能夠持續穩定的顯現熒光,4箇時間點GFP-MSCs的暘性率的可信區間分彆是:2週(14.64±2.05)%;4週(21.85±2.45)%;6週(31.03±4.03)%;8週(36.37±4.42)%.結論 GFP-MSCs在椎間盤微環境中能夠穩定增殖.若示蹤研究需要持續超過4週,則虛對GFP行免疫熒光染色,可以使有效示蹤時間持續至少8週.
목적 탐토록색형광단백(GFP)시종시효급GFP표기적골수간충질간세포(MSCs)재이식후삼여퇴변수복과정중적세포증식정황.방법 사용침흡수핵법건립토적추간반퇴변모형,체외배양MSCs,병용함유록색형광단백표기적선병독재체(Adeno-XTM-GFP)전염,성위GFP표기적MSCs(GFP-MSCs),우조모2주후식입조모적추간반내.재이식후제2、4、6、8주용격광공취초현미성상기술,관찰MSCs적증식정황,대비GFP본신형광화면역형광적시종시간.결과 비면역형광조GFP본신형광강도능구지속도4주,후교미약심지난이변별;면역형광조용FITC형광이항표기적GFP-MSCs재8주내도능구지속은정적현현형광,4개시간점GFP-MSCs적양성솔적가신구간분별시:2주(14.64±2.05)%;4주(21.85±2.45)%;6주(31.03±4.03)%;8주(36.37±4.42)%.결론 GFP-MSCs재추간반미배경중능구은정증식.약시종연구수요지속초과4주,칙허대GFP행면역형광염색,가이사유효시종시간지속지소8주.
