实用肝脏病杂志
實用肝髒病雜誌
실용간장병잡지
JOURNAL OF CLINICAL HEPATOLOGY
2010年
1期
16-18,25
,共4页
乙型肝炎病毒%YMDD自然变异%PCR
乙型肝炎病毒%YMDD自然變異%PCR
을형간염병독%YMDD자연변이%PCR
目的 筛选一种特异性及灵敏性较高的检测乙型肝炎病毒YMDD自然变异的方法.方法 通过分子克隆的方法,构建YMDD、YVDD及YIDD三种质粒;通过检测不同比例混合的质粒,比较PCR产物直接测序法、单探针特异性荧光PCR技术及引物特异性荧光PCR技术三种检测方法.结果 经酶切鉴定及直接测序鉴定,显示三种质粒构建成功;当待测模板占总模板的比例大于20%时,直接测序法才能准确检测;当突变株占总毒株的比例占50/51时,单探针特异性荧光PCR法才能判定该样品为YMDD变异型;当突,变株占总毒株的比例高于1/11时,引物特异性荧光PCR技术非特异结合的影响可忽略,具有很好的特异性,同时具有较高的灵敏性,检测突变株占总毒株的最低比例可达到1/11.结论 引物特异性荧光PCR技术特异性及灵敏性较高,适合用于乙型肝炎病毒YMDD自然突变株的检测.
目的 篩選一種特異性及靈敏性較高的檢測乙型肝炎病毒YMDD自然變異的方法.方法 通過分子剋隆的方法,構建YMDD、YVDD及YIDD三種質粒;通過檢測不同比例混閤的質粒,比較PCR產物直接測序法、單探針特異性熒光PCR技術及引物特異性熒光PCR技術三種檢測方法.結果 經酶切鑒定及直接測序鑒定,顯示三種質粒構建成功;噹待測模闆佔總模闆的比例大于20%時,直接測序法纔能準確檢測;噹突變株佔總毒株的比例佔50/51時,單探針特異性熒光PCR法纔能判定該樣品為YMDD變異型;噹突,變株佔總毒株的比例高于1/11時,引物特異性熒光PCR技術非特異結閤的影響可忽略,具有很好的特異性,同時具有較高的靈敏性,檢測突變株佔總毒株的最低比例可達到1/11.結論 引物特異性熒光PCR技術特異性及靈敏性較高,適閤用于乙型肝炎病毒YMDD自然突變株的檢測.
목적 사선일충특이성급령민성교고적검측을형간염병독YMDD자연변이적방법.방법 통과분자극륭적방법,구건YMDD、YVDD급YIDD삼충질립;통과검측불동비례혼합적질립,비교PCR산물직접측서법、단탐침특이성형광PCR기술급인물특이성형광PCR기술삼충검측방법.결과 경매절감정급직접측서감정,현시삼충질립구건성공;당대측모판점총모판적비례대우20%시,직접측서법재능준학검측;당돌변주점총독주적비례점50/51시,단탐침특이성형광PCR법재능판정해양품위YMDD변이형;당돌,변주점총독주적비례고우1/11시,인물특이성형광PCR기술비특이결합적영향가홀략,구유흔호적특이성,동시구유교고적령민성,검측돌변주점총독주적최저비례가체도1/11.결론 인물특이성형광PCR기술특이성급령민성교고,괄합용우을형간염병독YMDD자연돌변주적검측.
