CAJ | 학술논문

目的:建立从膀胱癌患者的分离并培养膀胱平滑肌细胞的实验技术.方法:取一小块无明显肿瘤生长的膀胱组织,分离并培养膀胱平滑肌细胞;动态观察细胞形态变化、生长增殖情况以及平滑肌肌动蛋白(SMA)、结蛋白(Desmin)和广谱细胞角蛋白(AE1/AE3)的表达.结果:接种24 h后即有长梭形细胞贴壁生长,10天后长至80%融合,呈典型的"峰谷"样形态;传代后1天为潜伏期,2～6天为指数生长期,然后进入融合平台期,需再次传代.第2代细胞的SMA和Desmin表达阳性率分别高达(99.0±0.8)%和(97.0±2.1)%,不表达AE1/AE3.随着传代次数的增加,细胞去分化,细胞形态变成短梭状或椭圆形;SMA和Desmin的表达开始下降,传至第5代时,SMA和Desmin阳性率分别降至(78.0±3.3)%和(74.0±2.6)%;至第7代时,SMA和Desmin阳性率降至(51.0±3.0)%和(49.0±2.6)%.第7代细胞经血清饥饿培养48 h后,细胞又能再分化,形态转变成长梭状,SMA和Desmin阳性率可分别升至(90.0±3.5)%和(88.0±2.5)%,具有显著性差异.结论:本研究所培养的人膀胱平滑肌细胞具有较高的纯度,血清饥饿能促进去分化的细胞再分化,能为构建组织工程膀胱提供种子细胞.
목적:건립종방광암환자적분리병배양방광평활기세포적실험기술.방법:취일소괴무명현종류생장적방광조직,분리병배양방광평활기세포;동태관찰세포형태변화、생장증식정황이급평활기기동단백(SMA)、결단백(Desmin)화엄보세포각단백(AE1/AE3)적표체.결과:접충24 h후즉유장사형세포첩벽생장,10천후장지80%융합,정전형적"봉곡"양형태;전대후1천위잠복기,2～6천위지수생장기,연후진입융합평태기,수재차전대.제2대세포적SMA화Desmin표체양성솔분별고체(99.0±0.8)%화(97.0±2.1)%,불표체AE1/AE3.수착전대차수적증가,세포거분화,세포형태변성단사상혹타원형;SMA화Desmin적표체개시하강,전지제5대시,SMA화Desmin양성솔분별강지(78.0±3.3)%화(74.0±2.6)%;지제7대시,SMA화Desmin양성솔강지(51.0±3.0)%화(49.0±2.6)%.제7대세포경혈청기아배양48 h후,세포우능재분화,형태전변성장사상,SMA화Desmin양성솔가분별승지(90.0±3.5)%화(88.0±2.5)%,구유현저성차이.결론:본연구소배양적인방광평활기세포구유교고적순도,혈청기아능촉진거분화적세포재분화,능위구건조직공정방광제공충자세포.