CAJ | 학술논문

通过流式细胞术,观察拯救鸡传染性贫血病毒突变株(CIAVM突变株)对宿主细胞MSB1的生长周期及凋亡的影响.拯救CIAVM突变株接于MDCC-MSB1细胞系,并相应设立阴性组(正常SPF鸡肝脏细胞液),阳性组(CUX-1标准毒株),进行培养24～48h.用PI及FITC AnnexinV染色方法,用流式细胞仪测定宿主细胞生长周期及凋亡,并用SPSS13.0进行结果统计学分析.接种拯救CIAVM突变株的宿主细胞G0/G1期的累积细胞百分率为(59.33±4.04)％,S期为(32.92±3.65)％,G2/M期为(7.75±3.11)％,与阴性组相比,G0/G1期细胞累积百分率有所上升；与CUX组相比,G0/G1期有所下降,但结果经统计学分析,差异均不显著(P＞0.05).试验组宿主细胞凋亡率为(37.00±4.65)％,与阴性组相比,凋亡率上升,统计学差异显著(P＜0.05)；与阳性组相比,凋亡率下降,统计学差异显著(P＜0.05).试验结果显示,经过VP3基因突变的CIAVM突变株,经过病毒拯救并回归SPF鸡后,对宿主细胞MSB1的生长周期没有显著的抑制,但能引起宿主细胞的显著性凋亡,且凋亡程度与CUX-1引起的宿主细胞凋亡率相比有所降低.可以表明,通过VP3密码子移位的基因突变,能够将CIAV的致凋亡作用降低,从而相应降低病毒的致病性,为以后构建CIAV减毒疫苗株奠定理论基础.
통과류식세포술,관찰증구계전염성빈혈병독돌변주(CIAVM돌변주)대숙주세포MSB1적생장주기급조망적영향.증구CIAVM돌변주접우MDCC-MSB1세포계,병상응설립음성조(정상SPF계간장세포액),양성조(CUX-1표준독주),진행배양24～48h.용PI급FITC AnnexinV염색방법,용류식세포의측정숙주세포생장주기급조망,병용SPSS13.0진행결과통계학분석.접충증구CIAVM돌변주적숙주세포G0/G1기적루적세포백분솔위(59.33±4.04)％,S기위(32.92±3.65)％,G2/M기위(7.75±3.11)％,여음성조상비,G0/G1기세포루적백분솔유소상승；여CUX조상비,G0/G1기유소하강,단결과경통계학분석,차이균불현저(P＞0.05).시험조숙주세포조망솔위(37.00±4.65)％,여음성조상비,조망솔상승,통계학차이현저(P＜0.05)；여양성조상비,조망솔하강,통계학차이현저(P＜0.05).시험결과현시,경과VP3기인돌변적CIAVM돌변주,경과병독증구병회귀SPF계후,대숙주세포MSB1적생장주기몰유현저적억제,단능인기숙주세포적현저성조망,차조망정도여CUX-1인기적숙주세포조망솔상비유소강저.가이표명,통과VP3밀마자이위적기인돌변,능구장CIAV적치조망작용강저,종이상응강저병독적치병성,위이후구건CIAV감독역묘주전정이론기출.