甘肃农业大学学报
甘肅農業大學學報
감숙농업대학학보
JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY
2012年
1期
8-12
,共5页
杨利恒%张勇%徐鹏%胡俊杰%高昭辉%薛慧文
楊利恆%張勇%徐鵬%鬍俊傑%高昭輝%薛慧文
양리항%장용%서붕%호준걸%고소휘%설혜문
奶牛%Bac5基因%克隆%原核表达%抑菌活性
奶牛%Bac5基因%剋隆%原覈錶達%抑菌活性
내우%Bac5기인%극륭%원핵표체%억균활성
根据已发表的牛Bac5 mRNA序列设计1对特异性引物,进行RT-PCR扩增,将目的片段定向克隆到原核表达载体PET28a(+),构建原核重组表达质粒PET28a-Bac5,并转化大肠杆菌Rosetta,进行IPTG诱导和SDS-PAGE检测.结果表明:采用RT-PCR技术成功扩增出414 bp去信号肽的Bac5基因片段,重组蛋白经ZPTG诱导和SDS-PAGE检测发现,在19 ku附近有1条清晰蛋白条带,与理论预测值大小一致；对表达的Bac5重组蛋白(rBac5)处理后进行抑菌活性的初步鉴定结果表明,rBac5对大肠杆菌(CVCC1450)和金黄色葡萄球菌(CVCC545)2种标准菌株和乳房炎乳的3种常见分离菌株均有一定的抑菌活性.
根據已髮錶的牛Bac5 mRNA序列設計1對特異性引物,進行RT-PCR擴增,將目的片段定嚮剋隆到原覈錶達載體PET28a(+),構建原覈重組錶達質粒PET28a-Bac5,併轉化大腸桿菌Rosetta,進行IPTG誘導和SDS-PAGE檢測.結果錶明:採用RT-PCR技術成功擴增齣414 bp去信號肽的Bac5基因片段,重組蛋白經ZPTG誘導和SDS-PAGE檢測髮現,在19 ku附近有1條清晰蛋白條帶,與理論預測值大小一緻；對錶達的Bac5重組蛋白(rBac5)處理後進行抑菌活性的初步鑒定結果錶明,rBac5對大腸桿菌(CVCC1450)和金黃色葡萄毬菌(CVCC545)2種標準菌株和乳房炎乳的3種常見分離菌株均有一定的抑菌活性.
근거이발표적우Bac5 mRNA서렬설계1대특이성인물,진행RT-PCR확증,장목적편단정향극륭도원핵표체재체PET28a(+),구건원핵중조표체질립PET28a-Bac5,병전화대장간균Rosetta,진행IPTG유도화SDS-PAGE검측.결과표명:채용RT-PCR기술성공확증출414 bp거신호태적Bac5기인편단,중조단백경ZPTG유도화SDS-PAGE검측발현,재19 ku부근유1조청석단백조대,여이론예측치대소일치；대표체적Bac5중조단백(rBac5)처리후진행억균활성적초보감정결과표명,rBac5대대장간균(CVCC1450)화금황색포도구균(CVCC545)2충표준균주화유방염유적3충상견분리균주균유일정적억균활성.
