医学综述
醫學綜述
의학종술
MEDICAL RECAPITULATE
2012年
6期
923-925
,共3页
贾淑芹%孟兴凯%王万祥%董培德%任建军
賈淑芹%孟興凱%王萬祥%董培德%任建軍
가숙근%맹흥개%왕만상%동배덕%임건군
诱导性多能干细胞%OCT4%增殖%迁移
誘導性多能榦細胞%OCT4%增殖%遷移
유도성다능간세포%OCT4%증식%천이
目的 应用基因转染技术将诱导性多能干细胞(iPS)相关基因OCT4过表达于喉癌Hep2细胞,观察其对Hep2细胞增殖力和侵袭迁移力的影响.方法 构建重组质粒真核表达载体pcDNA3.1-OCT4,将重组表达质粒用脂质体LipofactaminTM2000转染人喉癌Hep2细胞,通过G418筛选,RT-PCR及Western-blot印迹法鉴定,进而筛选出稳定表达pcDNA3.1-OCT4的Hep2细胞系;MTT实验检测细胞的活力,Transwell法检测细胞的侵袭和迁移.实验分为三组,Hep2-pcDNA3.1-OCT4组、Hep2-pcDNA3.1组及Hep2空白对照组.结果 成功将OCT4基因转染入Hep2细胞中,Hep2-pcDNA3.1-OCT4组可检测到目的基因在核酸、蛋白水平的高表达.转染后的细胞增殖、迁移加快,但细胞形态基本无变化.结论 iPS相关基因OCT4的转染能加快肿瘤细胞的生长和迁移,使Hep2细胞具有干细胞属性.
目的 應用基因轉染技術將誘導性多能榦細胞(iPS)相關基因OCT4過錶達于喉癌Hep2細胞,觀察其對Hep2細胞增殖力和侵襲遷移力的影響.方法 構建重組質粒真覈錶達載體pcDNA3.1-OCT4,將重組錶達質粒用脂質體LipofactaminTM2000轉染人喉癌Hep2細胞,通過G418篩選,RT-PCR及Western-blot印跡法鑒定,進而篩選齣穩定錶達pcDNA3.1-OCT4的Hep2細胞繫;MTT實驗檢測細胞的活力,Transwell法檢測細胞的侵襲和遷移.實驗分為三組,Hep2-pcDNA3.1-OCT4組、Hep2-pcDNA3.1組及Hep2空白對照組.結果 成功將OCT4基因轉染入Hep2細胞中,Hep2-pcDNA3.1-OCT4組可檢測到目的基因在覈痠、蛋白水平的高錶達.轉染後的細胞增殖、遷移加快,但細胞形態基本無變化.結論 iPS相關基因OCT4的轉染能加快腫瘤細胞的生長和遷移,使Hep2細胞具有榦細胞屬性.
목적 응용기인전염기술장유도성다능간세포(iPS)상관기인OCT4과표체우후암Hep2세포,관찰기대Hep2세포증식력화침습천이력적영향.방법 구건중조질립진핵표체재체pcDNA3.1-OCT4,장중조표체질립용지질체LipofactaminTM2000전염인후암Hep2세포,통과G418사선,RT-PCR급Western-blot인적법감정,진이사선출은정표체pcDNA3.1-OCT4적Hep2세포계;MTT실험검측세포적활력,Transwell법검측세포적침습화천이.실험분위삼조,Hep2-pcDNA3.1-OCT4조、Hep2-pcDNA3.1조급Hep2공백대조조.결과 성공장OCT4기인전염입Hep2세포중,Hep2-pcDNA3.1-OCT4조가검측도목적기인재핵산、단백수평적고표체.전염후적세포증식、천이가쾌,단세포형태기본무변화.결론 iPS상관기인OCT4적전염능가쾌종류세포적생장화천이,사Hep2세포구유간세포속성.
