中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2012年
6期
1147-1152
,共6页
庞荣清%张永云%阮光萍%朱向情%何洁%赵晶%王利民%潘兴华%张成
龐榮清%張永雲%阮光萍%硃嚮情%何潔%趙晶%王利民%潘興華%張成
방영청%장영운%원광평%주향정%하길%조정%왕이민%반흥화%장성
胚胎样干细胞%骨髓%成肌分化%肌纤维
胚胎樣榦細胞%骨髓%成肌分化%肌纖維
배태양간세포%골수%성기분화%기섬유
目的:比较骨髓来源的胚胎样干细胞(ELSCs)与间充质干细胞(MSCs)的体外成肌分化能力.方法:采用胚胎干细胞扩增用的无血清Knockout-DMEM培养基在明胶包被过的培养瓶中培养人骨髓单个核细胞以分离ELSCs,传统方法从相同骨髓中分离MSCs,倒置相差显微镜下观察细胞形态特征,采用免疫荧光染色鉴定多潜能抗原标志的表达.成肌分化液分别培养ELSCs和MSCs,采用免疫染色法检测肌纤维特异性抗原标志肌球蛋白重链(MHC)、成肌素(myogenin)和MyoD蛋白的表达,RT-PCR检测MHC、myogenin和MyoD mRNA的表达,计算MHC阳性肌纤维的比例以比较ELSCs与MSCs的体外成肌分化能力.结果:无血清培养基可从骨髓中分离到弱表达多潜能抗原标志Oct-4、Nanog-3和Sox-2的ELSCs,体积较小,形态纤细均一,在形态方面不同于相同骨髓来源的MSCs,后者不表达多潜能抗原标志.在成肌分化液中培养,ELSCs和MSCs均可被诱导为在蛋白和mRNA水平表达MHC和myogenin的多核肌纤维,但诱导培养10 d时,ELSCs的MHC蛋白阳性肌纤维的比例为(25.7±4.1)%,MSCs为(15.8±7.6)%,ELSCs的成肌分化能力明显高于MSCs(P<0.05).结论:骨髓ELSCs能被诱导为多核肌纤维,并具有比来自相同骨髓的MSCs更强的成肌分化能力,ELSCs是肌病治疗更理想的种子细胞.
目的:比較骨髓來源的胚胎樣榦細胞(ELSCs)與間充質榦細胞(MSCs)的體外成肌分化能力.方法:採用胚胎榦細胞擴增用的無血清Knockout-DMEM培養基在明膠包被過的培養瓶中培養人骨髓單箇覈細胞以分離ELSCs,傳統方法從相同骨髓中分離MSCs,倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態特徵,採用免疫熒光染色鑒定多潛能抗原標誌的錶達.成肌分化液分彆培養ELSCs和MSCs,採用免疫染色法檢測肌纖維特異性抗原標誌肌毬蛋白重鏈(MHC)、成肌素(myogenin)和MyoD蛋白的錶達,RT-PCR檢測MHC、myogenin和MyoD mRNA的錶達,計算MHC暘性肌纖維的比例以比較ELSCs與MSCs的體外成肌分化能力.結果:無血清培養基可從骨髓中分離到弱錶達多潛能抗原標誌Oct-4、Nanog-3和Sox-2的ELSCs,體積較小,形態纖細均一,在形態方麵不同于相同骨髓來源的MSCs,後者不錶達多潛能抗原標誌.在成肌分化液中培養,ELSCs和MSCs均可被誘導為在蛋白和mRNA水平錶達MHC和myogenin的多覈肌纖維,但誘導培養10 d時,ELSCs的MHC蛋白暘性肌纖維的比例為(25.7±4.1)%,MSCs為(15.8±7.6)%,ELSCs的成肌分化能力明顯高于MSCs(P<0.05).結論:骨髓ELSCs能被誘導為多覈肌纖維,併具有比來自相同骨髓的MSCs更彊的成肌分化能力,ELSCs是肌病治療更理想的種子細胞.
목적:비교골수래원적배태양간세포(ELSCs)여간충질간세포(MSCs)적체외성기분화능력.방법:채용배태간세포확증용적무혈청Knockout-DMEM배양기재명효포피과적배양병중배양인골수단개핵세포이분리ELSCs,전통방법종상동골수중분리MSCs,도치상차현미경하관찰세포형태특정,채용면역형광염색감정다잠능항원표지적표체.성기분화액분별배양ELSCs화MSCs,채용면역염색법검측기섬유특이성항원표지기구단백중련(MHC)、성기소(myogenin)화MyoD단백적표체,RT-PCR검측MHC、myogenin화MyoD mRNA적표체,계산MHC양성기섬유적비례이비교ELSCs여MSCs적체외성기분화능력.결과:무혈청배양기가종골수중분리도약표체다잠능항원표지Oct-4、Nanog-3화Sox-2적ELSCs,체적교소,형태섬세균일,재형태방면불동우상동골수래원적MSCs,후자불표체다잠능항원표지.재성기분화액중배양,ELSCs화MSCs균가피유도위재단백화mRNA수평표체MHC화myogenin적다핵기섬유,단유도배양10 d시,ELSCs적MHC단백양성기섬유적비례위(25.7±4.1)%,MSCs위(15.8±7.6)%,ELSCs적성기분화능력명현고우MSCs(P<0.05).결론:골수ELSCs능피유도위다핵기섬유,병구유비래자상동골수적MSCs경강적성기분화능력,ELSCs시기병치료경이상적충자세포.
