CAJ | 학술논문

目的对羊膜上皮细胞培养液抑制由肿瘤坏死因子(TNF-α)诱发的角膜基质细胞凋亡进行研究.方法体外培养兔角膜基质细胞(RCK),30 ng/ml TNF-α诱发角膜基质细胞凋亡.实验分为对照组、羊膜上皮细胞培养液组(羊膜组)和阴性对照组.应用FITC-dUTP-TUNEL和DAPI染色检测RCK细胞凋亡发生率,分别测定经24 h培养后各组细胞凋亡特异性DNA梯形降解.Western blot检测细胞凋亡保护性因子Bcl-2、促进因子Bax在经羊膜上皮细胞培养液处理后于细胞中表达强度及Bcl-2/Bax比值变化.结果羊膜上皮细胞培养液明显抑制由TNF-α诱发的兔角膜基质细胞凋亡,DAPI染色显示24 h对照组,羊膜培养液组和阴性对照组细胞凋亡发生率分别为:42.4%±4.3%,2.2%±0.3%和2.7%±0.4%.DNA降解实验显示羊膜上皮细胞培养液明显抑制TNF-α诱导的DNA片段降解.Western blot显示羊膜上皮细胞培养液明显刺激RCK细胞Bcl-2蛋白的表达和分泌.结论羊膜培养液中可能释放的多种细胞因子对TNF-α诱发的角膜基质细胞凋亡具有明显的抑制作用,其作用机制之一是刺激Bcl-2在RCK细胞的表达,并使Bcl-2/Bax比值上调.
목적대양막상피세포배양액억제유종류배사인자(TNF-α)유발적각막기질세포조망진행연구.방법체외배양토각막기질세포(RCK),30 ng/ml TNF-α유발각막기질세포조망.실험분위대조조、양막상피세포배양액조(양막조)화음성대조조.응용FITC-dUTP-TUNEL화DAPI염색검측RCK세포조망발생솔,분별측정경24 h배양후각조세포조망특이성DNA제형강해.Western blot검측세포조망보호성인자Bcl-2、촉진인자Bax재경양막상피세포배양액처리후우세포중표체강도급Bcl-2/Bax비치변화.결과양막상피세포배양액명현억제유TNF-α유발적토각막기질세포조망,DAPI염색현시24 h대조조,양막배양액조화음성대조조세포조망발생솔분별위:42.4%±4.3%,2.2%±0.3%화2.7%±0.4%.DNA강해실험현시양막상피세포배양액명현억제TNF-α유도적DNA편단강해.Western blot현시양막상피세포배양액명현자격RCK세포Bcl-2단백적표체화분비.결론양막배양액중가능석방적다충세포인자대TNF-α유발적각막기질세포조망구유명현적억제작용,기작용궤제지일시자격Bcl-2재RCK세포적표체,병사Bcl-2/Bax비치상조.