中国肿瘤生物治疗杂志
中國腫瘤生物治療雜誌
중국종류생물치료잡지
CHINESE JOURNAL OF CANCER BIOTHERAPY
2008年
5期
444-450
,共7页
4′-甲醚-黄芩素(4-MS)%人绒毛膜癌JAR细胞%Caspase3%Survivin%p38MAPK信号通路
4′-甲醚-黃芩素(4-MS)%人絨毛膜癌JAR細胞%Caspase3%Survivin%p38MAPK信號通路
4′-갑미-황금소(4-MS)%인융모막암JAR세포%Caspase3%Survivin%p38MAPK신호통로
目的:探讨马鞭草有效成分所提取的单体4′-甲醚-黄芩素(4′-methylether-scutellarein,4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及其相关机制.方法:JAR细胞传代后加入不同浓度4-MS作用一定时间,应用MTT法检测对细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞周期变化, AO/EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞,RT-PCR技术分析4-MS对人绒毛膜癌JAR细胞凋亡相关基因Caspase 3、p38 MAPK及Survivin表达的影响, 并进一步用Western blotting测定Caspase 3、p38 MAPK及Survivin在用药前后蛋白水平的表达差异.结果:不同质量浓度(10、20、40 mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,并随药物浓度和作用时间的增加而不断增强(P<0.05,P<0.01); 流式细胞术显示,随着药物浓度的增加细胞凋亡率亦逐渐升高,G2/M期细胞所占比例增大 (P<0.05); AO/EB双染后发现,随着4-MS剂量的增加,晚期凋亡细胞逐渐增多; 20和40 mg/L的4-MS作用48 h后, JAR细胞中p38 MAPK及Caspase 3 mRNA表达下降,Survivin mRNA表达上升,与对照组相比均有统计学意义(P<0.05);Western blotting证实,20 mg/L和40 mg/L 4-MS作用48 h后Survivin蛋白表达量显著下降,p38磷酸化水平升高,Caspase 3被明显激活. 结论:4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖并诱导凋亡,可能与其阻滞细胞生长于G2/M期、抑制Survivin抗凋亡活性,直接激活p38 MAPK信号通路和Caspase 3活化有关.
目的:探討馬鞭草有效成分所提取的單體4′-甲醚-黃芩素(4′-methylether-scutellarein,4-MS)對人絨毛膜癌JAR細胞的增殖抑製作用及其相關機製.方法:JAR細胞傳代後加入不同濃度4-MS作用一定時間,應用MTT法檢測對細胞增殖的抑製作用,流式細胞術測定細胞凋亡率及細胞週期變化, AO/EB雙染法區分早、晚期凋亡細胞和壞死細胞,RT-PCR技術分析4-MS對人絨毛膜癌JAR細胞凋亡相關基因Caspase 3、p38 MAPK及Survivin錶達的影響, 併進一步用Western blotting測定Caspase 3、p38 MAPK及Survivin在用藥前後蛋白水平的錶達差異.結果:不同質量濃度(10、20、40 mg/L)的4-MS對JAR細胞均有增殖抑製作用,併隨藥物濃度和作用時間的增加而不斷增彊(P<0.05,P<0.01); 流式細胞術顯示,隨著藥物濃度的增加細胞凋亡率亦逐漸升高,G2/M期細胞所佔比例增大 (P<0.05); AO/EB雙染後髮現,隨著4-MS劑量的增加,晚期凋亡細胞逐漸增多; 20和40 mg/L的4-MS作用48 h後, JAR細胞中p38 MAPK及Caspase 3 mRNA錶達下降,Survivin mRNA錶達上升,與對照組相比均有統計學意義(P<0.05);Western blotting證實,20 mg/L和40 mg/L 4-MS作用48 h後Survivin蛋白錶達量顯著下降,p38燐痠化水平升高,Caspase 3被明顯激活. 結論:4-MS能抑製人絨毛膜癌JAR細胞的增殖併誘導凋亡,可能與其阻滯細胞生長于G2/M期、抑製Survivin抗凋亡活性,直接激活p38 MAPK信號通路和Caspase 3活化有關.
목적:탐토마편초유효성분소제취적단체4′-갑미-황금소(4′-methylether-scutellarein,4-MS)대인융모막암JAR세포적증식억제작용급기상관궤제.방법:JAR세포전대후가입불동농도4-MS작용일정시간,응용MTT법검측대세포증식적억제작용,류식세포술측정세포조망솔급세포주기변화, AO/EB쌍염법구분조、만기조망세포화배사세포,RT-PCR기술분석4-MS대인융모막암JAR세포조망상관기인Caspase 3、p38 MAPK급Survivin표체적영향, 병진일보용Western blotting측정Caspase 3、p38 MAPK급Survivin재용약전후단백수평적표체차이.결과:불동질량농도(10、20、40 mg/L)적4-MS대JAR세포균유증식억제작용,병수약물농도화작용시간적증가이불단증강(P<0.05,P<0.01); 류식세포술현시,수착약물농도적증가세포조망솔역축점승고,G2/M기세포소점비례증대 (P<0.05); AO/EB쌍염후발현,수착4-MS제량적증가,만기조망세포축점증다; 20화40 mg/L적4-MS작용48 h후, JAR세포중p38 MAPK급Caspase 3 mRNA표체하강,Survivin mRNA표체상승,여대조조상비균유통계학의의(P<0.05);Western blotting증실,20 mg/L화40 mg/L 4-MS작용48 h후Survivin단백표체량현저하강,p38린산화수평승고,Caspase 3피명현격활. 결론:4-MS능억제인융모막암JAR세포적증식병유도조망,가능여기조체세포생장우G2/M기、억제Survivin항조망활성,직접격활p38 MAPK신호통로화Caspase 3활화유관.
