中国肿瘤临床
中國腫瘤臨床
중국종류림상
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY
2012年
8期
429-432
,共4页
多健%王国文%韩秀鑫%杨吉龙%孙建合
多健%王國文%韓秀鑫%楊吉龍%孫建閤
다건%왕국문%한수흠%양길룡%손건합
骨肉瘤%蛋白酶体抑制剂%脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶1%NF-kB蛋白
骨肉瘤%蛋白酶體抑製劑%脫嘌呤脫嘧啶覈痠內切酶1%NF-kB蛋白
골육류%단백매체억제제%탈표령탈밀정핵산내절매1%NF-kB단백
目的:探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶 1(APE1)基因沉默对蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib,PS-341)抑制骨肉 瘤 U2-OS细胞增殖作用的影响及其生物学机制.方法:将 APE1特异性 shRNA的重组质粒,稳定转染人骨肉瘤 U2-OS细胞,采用 聚合酶链反应和免疫印迹法检测转染前后 U2-OS细胞中 APE1的表达,采用四甲基偶氮唑盐法观察 PS-341和 APE1-siRNA对人 骨肉瘤 U2-OS细胞生长的抑制作用,采用免疫印迹法检测 PS-341和 APE1-siRNA对 U2-OS细胞中 APE1和胞核 NF-κB的表达的 影响.结果:细胞稳定转染 APE1-siRNA重组质粒后,APE1mRNA和蛋白表达分别下降约 46.1%和 62.6%,MTT法检测 U2-OS细 胞增殖受到抑制.转染前后 U2-OS细胞 PS-341的 IC50值分别为 371.54 nmoL/L与 109.64 nmoL/L,两者比较差异有统计学意义 (P<0.01).Western blot结果显示 PS-341和 APE1-siRNA均抑制 U2-OS细胞胞核中 NF-κB的表达,两者联合应用抑制效果更明 显.结论:APE1-shRNA质粒转染骨肉瘤 U2-OS细胞后,肿瘤细胞的增殖率降低,对 PS-341抑制 U2-OS细胞的增殖具有协同作 用.推测其生物学机制可能与下调胞核 NF-κB蛋白表达有关.
目的:探討脫嘌呤/脫嘧啶覈痠內切酶 1(APE1)基因沉默對蛋白酶體抑製劑硼替佐米(bortezomib,PS-341)抑製骨肉 瘤 U2-OS細胞增殖作用的影響及其生物學機製.方法:將 APE1特異性 shRNA的重組質粒,穩定轉染人骨肉瘤 U2-OS細胞,採用 聚閤酶鏈反應和免疫印跡法檢測轉染前後 U2-OS細胞中 APE1的錶達,採用四甲基偶氮唑鹽法觀察 PS-341和 APE1-siRNA對人 骨肉瘤 U2-OS細胞生長的抑製作用,採用免疫印跡法檢測 PS-341和 APE1-siRNA對 U2-OS細胞中 APE1和胞覈 NF-κB的錶達的 影響.結果:細胞穩定轉染 APE1-siRNA重組質粒後,APE1mRNA和蛋白錶達分彆下降約 46.1%和 62.6%,MTT法檢測 U2-OS細 胞增殖受到抑製.轉染前後 U2-OS細胞 PS-341的 IC50值分彆為 371.54 nmoL/L與 109.64 nmoL/L,兩者比較差異有統計學意義 (P<0.01).Western blot結果顯示 PS-341和 APE1-siRNA均抑製 U2-OS細胞胞覈中 NF-κB的錶達,兩者聯閤應用抑製效果更明 顯.結論:APE1-shRNA質粒轉染骨肉瘤 U2-OS細胞後,腫瘤細胞的增殖率降低,對 PS-341抑製 U2-OS細胞的增殖具有協同作 用.推測其生物學機製可能與下調胞覈 NF-κB蛋白錶達有關.
목적:탐토탈표령/탈밀정핵산내절매 1(APE1)기인침묵대단백매체억제제붕체좌미(bortezomib,PS-341)억제골육 류 U2-OS세포증식작용적영향급기생물학궤제.방법:장 APE1특이성 shRNA적중조질립,은정전염인골육류 U2-OS세포,채용 취합매련반응화면역인적법검측전염전후 U2-OS세포중 APE1적표체,채용사갑기우담서염법관찰 PS-341화 APE1-siRNA대인 골육류 U2-OS세포생장적억제작용,채용면역인적법검측 PS-341화 APE1-siRNA대 U2-OS세포중 APE1화포핵 NF-κB적표체적 영향.결과:세포은정전염 APE1-siRNA중조질립후,APE1mRNA화단백표체분별하강약 46.1%화 62.6%,MTT법검측 U2-OS세 포증식수도억제.전염전후 U2-OS세포 PS-341적 IC50치분별위 371.54 nmoL/L여 109.64 nmoL/L,량자비교차이유통계학의의 (P<0.01).Western blot결과현시 PS-341화 APE1-siRNA균억제 U2-OS세포포핵중 NF-κB적표체,량자연합응용억제효과경명 현.결론:APE1-shRNA질립전염골육류 U2-OS세포후,종류세포적증식솔강저,대 PS-341억제 U2-OS세포적증식구유협동작 용.추측기생물학궤제가능여하조포핵 NF-κB단백표체유관.
