实验室研究与探索
實驗室研究與探索
실험실연구여탐색
LAABORATORY REESEARCH AND EXPLORATION
2012年
4期
5-8,78
,共5页
房志家%陈婷%郝贺龙%张兴群%黄志伟
房誌傢%陳婷%郝賀龍%張興群%黃誌偉
방지가%진정%학하룡%장흥군%황지위
酿酒酵母%转化效率%电转化%DTF%LiAc
釀酒酵母%轉化效率%電轉化%DTF%LiAc
양주효모%전화효솔%전전화%DTF%LiAc
在现有电转化和聚乙二醇、醋酸锂( PEG/LiAc)诱导的化学转化的基础上,进一步研究和探索了酿酒酵母感受态细胞不同预处理及相应的转化条件对转化效率的影响.结果表明:处于对数生长早期(0D600=0.6)的酵母细胞的转化效果最佳；电转化中分别以120 mmol/L的DTT和300 mmol/L的LiAc预处理感受态酵母菌10 min,可以得到较高的转化效果；联合使用120 mmol/L DTT和300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到7.15×105 cfu/μg,PEG/LiAc诱导的化学转化中使用300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到2.75×105 cfu/μg,远高于文献报道的水平.同时证明了改进后的转化方法同样能够提高外源DNA同源重组转化效率.
在現有電轉化和聚乙二醇、醋痠鋰( PEG/LiAc)誘導的化學轉化的基礎上,進一步研究和探索瞭釀酒酵母感受態細胞不同預處理及相應的轉化條件對轉化效率的影響.結果錶明:處于對數生長早期(0D600=0.6)的酵母細胞的轉化效果最佳；電轉化中分彆以120 mmol/L的DTT和300 mmol/L的LiAc預處理感受態酵母菌10 min,可以得到較高的轉化效果；聯閤使用120 mmol/L DTT和300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母轉化效率,達到7.15×105 cfu/μg,PEG/LiAc誘導的化學轉化中使用300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母轉化效率,達到2.75×105 cfu/μg,遠高于文獻報道的水平.同時證明瞭改進後的轉化方法同樣能夠提高外源DNA同源重組轉化效率.
재현유전전화화취을이순、작산리( PEG/LiAc)유도적화학전화적기출상,진일보연구화탐색료양주효모감수태세포불동예처리급상응적전화조건대전화효솔적영향.결과표명:처우대수생장조기(0D600=0.6)적효모세포적전화효과최가；전전화중분별이120 mmol/L적DTT화300 mmol/L적LiAc예처리감수태효모균10 min,가이득도교고적전화효과；연합사용120 mmol/L DTT화300 mmol/L LiAc능대폭제승효모전화효솔,체도7.15×105 cfu/μg,PEG/LiAc유도적화학전화중사용300 mmol/L LiAc능대폭제승효모전화효솔,체도2.75×105 cfu/μg,원고우문헌보도적수평.동시증명료개진후적전화방법동양능구제고외원DNA동원중조전화효솔.
