CAJ | 학술논문

目的观察PTEN过度表达对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激所致钙/钙调神经磷酸酶(Ca2+/CaN)信号通路激活的影响,探讨PTEN负性调控心肌肥厚的作用机制.方法通过携带野生型PTEN基因的腺病毒(Ad-PTEN)感染构建过度表达PTEN的原代培养心肌细胞模型,用AngⅡ作为促心肌肥厚刺激剂,Fura-2/AM比率荧光成像系统检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i),逆转录聚合酶链反应检测受感染细胞内心房利钠因子(ANF)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)与CaNAβ的mRNA表达,Western blot检测CaNAβ的蛋白表达,同时测定CaN活性.结果Ad-PTEN感染后,心肌细胞内过度表达PTEN的mRNA和蛋白.PTEN的过度表达能够明显抑制AngⅡ刺激所致的心肌细胞肥大标志基因表达.AngⅡ刺激使[Ca2+]i、CaNAβ mRNA与蛋白表达以及CaN活性明显增高,PTEN过度表达能够明显抑制AngⅡ引起的[Ca2+]i、CaNAβ mRNA与蛋白表达以及CaN活性增高.结论PTEN过度表达可能通过抑制Ca2+/CaN信号通路,负性调控AngⅡ刺激所致的心肌细胞肥大.
목적관찰PTEN과도표체대혈관긴장소Ⅱ(AngⅡ)자격소치개/개조신경린산매(Ca2+/CaN)신호통로격활적영향,탐토PTEN부성조공심기비후적작용궤제.방법통과휴대야생형PTEN기인적선병독(Ad-PTEN)감염구건과도표체PTEN적원대배양심기세포모형,용AngⅡ작위촉심기비후자격제,Fura-2/AM비솔형광성상계통검측세포내Ca2+농도([Ca2+]i),역전록취합매련반응검측수감염세포내심방리납인자(ANF)、β-기구단백중련(β-MHC)여CaNAβ적mRNA표체,Western blot검측CaNAβ적단백표체,동시측정CaN활성.결과Ad-PTEN감염후,심기세포내과도표체PTEN적mRNA화단백.PTEN적과도표체능구명현억제AngⅡ자격소치적심기세포비대표지기인표체.AngⅡ자격사[Ca2+]i、CaNAβ mRNA여단백표체이급CaN활성명현증고,PTEN과도표체능구명현억제AngⅡ인기적[Ca2+]i、CaNAβ mRNA여단백표체이급CaN활성증고.결론PTEN과도표체가능통과억제Ca2+/CaN신호통로,부성조공AngⅡ자격소치적심기세포비대.