微生物学免疫学进展
微生物學免疫學進展
미생물학면역학진전
PROGRESS IN MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2001年
3期
10-13
,共4页
张东伟%梁布锋%祁自柏%凌世淦
張東偉%樑佈鋒%祁自柏%凌世淦
장동위%량포봉%기자백%릉세감
HCVE2%真核系统%基因表达
HCVE2%真覈繫統%基因錶達
HCVE2%진핵계통%기인표체
以原核表达载体pET-E2为模板,用PCR的方法重新扩增出带有适于真核表达载体多克隆位点的E2基因.PCR产物经纯化并双酶切后与相同处理的真核表达载体pSecTag2/Hygro连接并转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,重组表达载体在大量扩增并纯化后再转染COS7细胞.收集的培养上清经过Ni-柱纯化,用ELISA进行血清检测显示:6份HCV阳性血清中有4份检出有E2抗体,而5份HCV阴性血清中也有一份检出有E2抗体.
以原覈錶達載體pET-E2為模闆,用PCR的方法重新擴增齣帶有適于真覈錶達載體多剋隆位點的E2基因.PCR產物經純化併雙酶切後與相同處理的真覈錶達載體pSecTag2/Hygro連接併轉化大腸桿菌DH5α感受態細胞,重組錶達載體在大量擴增併純化後再轉染COS7細胞.收集的培養上清經過Ni-柱純化,用ELISA進行血清檢測顯示:6份HCV暘性血清中有4份檢齣有E2抗體,而5份HCV陰性血清中也有一份檢齣有E2抗體.
이원핵표체재체pET-E2위모판,용PCR적방법중신확증출대유괄우진핵표체재체다극륭위점적E2기인.PCR산물경순화병쌍매절후여상동처리적진핵표체재체pSecTag2/Hygro련접병전화대장간균DH5α감수태세포,중조표체재체재대량확증병순화후재전염COS7세포.수집적배양상청경과Ni-주순화,용ELISA진행혈청검측현시:6빈HCV양성혈청중유4빈검출유E2항체,이5빈HCV음성혈청중야유일빈검출유E2항체.
