重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2004年
3期
337-339
,共3页
cDNA克隆%巢式PCR%一步法克隆
cDNA剋隆%巢式PCR%一步法剋隆
cDNA극륭%소식PCR%일보법극륭
目的:克隆与表达arresten;方法:从正常的肝组织提取总RNA,逆转录成cDNA,根据软件RNASTRUCTURE3.5设计两对引物,巢式PCR扩增arresten基因,其中每个内引物5'端加上特殊核苷酸,PCR产物用T4DNA Polymerase处理后直接与用NdeI,EcoRI酶切的表达质粒pTYB1连接,转化大肠杆菌ER2566.筛选重组子,诱导表达.结果:快速一步法克隆表达了arresten.讨论:一步法克隆快速,高效.
目的:剋隆與錶達arresten;方法:從正常的肝組織提取總RNA,逆轉錄成cDNA,根據軟件RNASTRUCTURE3.5設計兩對引物,巢式PCR擴增arresten基因,其中每箇內引物5'耑加上特殊覈苷痠,PCR產物用T4DNA Polymerase處理後直接與用NdeI,EcoRI酶切的錶達質粒pTYB1連接,轉化大腸桿菌ER2566.篩選重組子,誘導錶達.結果:快速一步法剋隆錶達瞭arresten.討論:一步法剋隆快速,高效.
목적:극륭여표체arresten;방법:종정상적간조직제취총RNA,역전록성cDNA,근거연건RNASTRUCTURE3.5설계량대인물,소식PCR확증arresten기인,기중매개내인물5'단가상특수핵감산,PCR산물용T4DNA Polymerase처리후직접여용NdeI,EcoRI매절적표체질립pTYB1련접,전화대장간균ER2566.사선중조자,유도표체.결과:쾌속일보법극륭표체료arresten.토론:일보법극륭쾌속,고효.
