CAJ | 학술논문

生物大分子的液-固色谱纯化过程中固相载体会产生产物吸附、变性等不良影响.高速逆流色谱无需固相载体,且具有高分便率和高回收率的优点,其中有机相/水相体系在分离天然产物中应用广泛,而应用双水相体系分离生物大分子尚处于研究阶段.双水相高速逆流色谱体系的建立与仪器设备及操作工艺条件密切相关,因此利用多分离柱高速逆流色谱仪,研究了PEG1000-无机盐双水相体系对标准蛋白质混合物以及卵白蛋白的分离.pH值和PEG浓度对不同种类蛋白质的分配系数影响不同,实验发现在pH9.2的15.0%(W/W)PEG1000-17.0%(W/W)磷酸钾盐体系中,细胞色素C、溶菌酶和肌红蛋白的分配系数差异较大,且分布合理,因而采用该体系在0.8mL/min流速,850r/min转速的条件下,成功分离了细胞色素C、溶菌酶和肌红蛋白的混合物.实验也发现在pH9.2的16.0%(W/W)PEG1000-17.0%(W/W)磷酸钾盐体系中,鸡蛋清样品中的主要蛋白质成分:卵转铁蛋白、卵白蛋白和溶菌酶的分配系数差异最大,因而采用该体系在1.8mL/min流速、850r/min转速的条件下,200 min内从鸡蛋清样品中成功分离卵白蛋白,其电泳纯度为100%,收率为95%.
생물대분자적액-고색보순화과정중고상재체회산생산물흡부、변성등불량영향.고속역류색보무수고상재체,차구유고분편솔화고회수솔적우점,기중유궤상/수상체계재분리천연산물중응용엄범,이응용쌍수상체계분리생물대분자상처우연구계단.쌍수상고속역류색보체계적건립여의기설비급조작공예조건밀절상관,인차이용다분리주고속역류색보의,연구료PEG1000-무궤염쌍수상체계대표준단백질혼합물이급란백단백적분리.pH치화PEG농도대불동충류단백질적분배계수영향불동,실험발현재pH9.2적15.0%(W/W)PEG1000-17.0%(W/W)린산갑염체계중,세포색소C、용균매화기홍단백적분배계수차이교대,차분포합리,인이채용해체계재0.8mL/min류속,850r/min전속적조건하,성공분리료세포색소C、용균매화기홍단백적혼합물.실험야발현재pH9.2적16.0%(W/W)PEG1000-17.0%(W/W)린산갑염체계중,계단청양품중적주요단백질성분:란전철단백、란백단백화용균매적분배계수차이최대,인이채용해체계재1.8mL/min류속、850r/min전속적조건하,200 min내종계단청양품중성공분리란백단백,기전영순도위100%,수솔위95%.