中国公共卫生
中國公共衛生
중국공공위생
CHINA PUBLIC HEALTH
2006年
7期
833-834
,共2页
镉%生物检测%绿色荧光蛋白(GFP)
鎘%生物檢測%綠色熒光蛋白(GFP)
력%생물검측%록색형광단백(GFP)
目的以绿色荧光蛋白(GFP)基因为报告基因,和重金属镉特异性启动子PcadA构建成基因工程重组体,用于重金属镉的特异性检测.方法采用聚合酶链(PCR)方法从质粒pPcadA上扩增得到重金属镉离子特异性诱导启动子PcadA,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,以大肠埃希菌-枯草杆菌穿梭载体pNW33N构建了绿色荧光蛋白镉离子诱导表达载体.以枯草芽孢杆菌1A751为宿主菌,采用感受态转化法将表达载体导入1A751,成功构建镉离子检测菌株.结果通过酶切鉴定、PCR和DNA序列分析,重组载体构建成功,并在有镉离子存在的环境中得到表达.结论该工程菌株能够以绿色荧光蛋白基因为报告基因检测培养体系中最低浓度达0.1 μmol/L的镉离子;利用该菌株有望建立起一种方便快捷的重金属镉的检测方法,有较高的应用价值.
目的以綠色熒光蛋白(GFP)基因為報告基因,和重金屬鎘特異性啟動子PcadA構建成基因工程重組體,用于重金屬鎘的特異性檢測.方法採用聚閤酶鏈(PCR)方法從質粒pPcadA上擴增得到重金屬鎘離子特異性誘導啟動子PcadA,以綠色熒光蛋白基因為報告基因,以大腸埃希菌-枯草桿菌穿梭載體pNW33N構建瞭綠色熒光蛋白鎘離子誘導錶達載體.以枯草芽孢桿菌1A751為宿主菌,採用感受態轉化法將錶達載體導入1A751,成功構建鎘離子檢測菌株.結果通過酶切鑒定、PCR和DNA序列分析,重組載體構建成功,併在有鎘離子存在的環境中得到錶達.結論該工程菌株能夠以綠色熒光蛋白基因為報告基因檢測培養體繫中最低濃度達0.1 μmol/L的鎘離子;利用該菌株有望建立起一種方便快捷的重金屬鎘的檢測方法,有較高的應用價值.
목적이록색형광단백(GFP)기인위보고기인,화중금속력특이성계동자PcadA구건성기인공정중조체,용우중금속력적특이성검측.방법채용취합매련(PCR)방법종질립pPcadA상확증득도중금속력리자특이성유도계동자PcadA,이록색형광단백기인위보고기인,이대장애희균-고초간균천사재체pNW33N구건료록색형광단백력리자유도표체재체.이고초아포간균1A751위숙주균,채용감수태전화법장표체재체도입1A751,성공구건력리자검측균주.결과통과매절감정、PCR화DNA서렬분석,중조재체구건성공,병재유력리자존재적배경중득도표체.결론해공정균주능구이록색형광단백기인위보고기인검측배양체계중최저농도체0.1 μmol/L적력리자;이용해균주유망건립기일충방편쾌첩적중금속력적검측방법,유교고적응용개치.
