园艺学报
園藝學報
완예학보
ACTA HORTICULTURAE SINICA
2007年
2期
283-288
,共6页
朱元娣%孙凌霞%李春雨%张文%王涛
硃元娣%孫凌霞%李春雨%張文%王濤
주원제%손릉하%리춘우%장문%왕도
苹果%柱型苹果%柱型基因%差异表达分析%cDNA-AFLP
蘋果%柱型蘋果%柱型基因%差異錶達分析%cDNA-AFLP
평과%주형평과%주형기인%차이표체분석%cDNA-AFLP
以苹果(Malus×domestica Borkh.)柱型品种舞姿、非柱型品种富士及其杂交F1群体中柱型、非柱型单株为研究试材,应用cDNA-AFLP (cDNA-amplified fragment length polymorphism)技术,研究柱型与非柱型苹果cDNA的差异表达,探讨了苹果柱型基因Co表达的分子机制.通过64对引物组合的cDNA-AFLP分析获得了1 630条在柱型与非柱型苹果中差异表达的片段.经过BSA(bulked segregant analysis)分析和反向Northern杂交鉴定,获得了11个差异表达的cDNA片段,并进行了克隆、测序和序列同源性检索分析.有5个片段在GenBank数据库中发现同源序列,其余的6个功能未知.核酸和氨基酸比对分析中同源性最高的是片段A7和A16.A7的核苷酸序列同源于红叶石楠Photinia fraseri 26S核糖体RNA(97%)、蛋白同源于玉米的细胞色素P450单加氧酶 (91%),A16的核苷酸(85%)及蛋白(93%)同源于直果草属Triphysaria versicolor的α-expansin 2基因.对A7、A16两个候选基因片段再进行正向Northern杂交验证,在富士中表达最强,在非柱型后代、柱型后代及舞姿中表达依次减弱.由此推断,由细胞色素P450单加氧酶基因所调控的赤霉素GAS变化影响了苹果柱型性状的表达.
以蘋果(Malus×domestica Borkh.)柱型品種舞姿、非柱型品種富士及其雜交F1群體中柱型、非柱型單株為研究試材,應用cDNA-AFLP (cDNA-amplified fragment length polymorphism)技術,研究柱型與非柱型蘋果cDNA的差異錶達,探討瞭蘋果柱型基因Co錶達的分子機製.通過64對引物組閤的cDNA-AFLP分析穫得瞭1 630條在柱型與非柱型蘋果中差異錶達的片段.經過BSA(bulked segregant analysis)分析和反嚮Northern雜交鑒定,穫得瞭11箇差異錶達的cDNA片段,併進行瞭剋隆、測序和序列同源性檢索分析.有5箇片段在GenBank數據庫中髮現同源序列,其餘的6箇功能未知.覈痠和氨基痠比對分析中同源性最高的是片段A7和A16.A7的覈苷痠序列同源于紅葉石楠Photinia fraseri 26S覈糖體RNA(97%)、蛋白同源于玉米的細胞色素P450單加氧酶 (91%),A16的覈苷痠(85%)及蛋白(93%)同源于直果草屬Triphysaria versicolor的α-expansin 2基因.對A7、A16兩箇候選基因片段再進行正嚮Northern雜交驗證,在富士中錶達最彊,在非柱型後代、柱型後代及舞姿中錶達依次減弱.由此推斷,由細胞色素P450單加氧酶基因所調控的赤黴素GAS變化影響瞭蘋果柱型性狀的錶達.
이평과(Malus×domestica Borkh.)주형품충무자、비주형품충부사급기잡교F1군체중주형、비주형단주위연구시재,응용cDNA-AFLP (cDNA-amplified fragment length polymorphism)기술,연구주형여비주형평과cDNA적차이표체,탐토료평과주형기인Co표체적분자궤제.통과64대인물조합적cDNA-AFLP분석획득료1 630조재주형여비주형평과중차이표체적편단.경과BSA(bulked segregant analysis)분석화반향Northern잡교감정,획득료11개차이표체적cDNA편단,병진행료극륭、측서화서렬동원성검색분석.유5개편단재GenBank수거고중발현동원서렬,기여적6개공능미지.핵산화안기산비대분석중동원성최고적시편단A7화A16.A7적핵감산서렬동원우홍협석남Photinia fraseri 26S핵당체RNA(97%)、단백동원우옥미적세포색소P450단가양매 (91%),A16적핵감산(85%)급단백(93%)동원우직과초속Triphysaria versicolor적α-expansin 2기인.대A7、A16량개후선기인편단재진행정향Northern잡교험증,재부사중표체최강,재비주형후대、주형후대급무자중표체의차감약.유차추단,유세포색소P450단가양매기인소조공적적매소GAS변화영향료평과주형성상적표체.
