日本血吸虫Sj-Ts4样蛋白基因的克隆、表达和初步鉴定
일본혈흡충Sj-Ts4양단백기인적극륭、표체화초보감정
Cloning expression and identification of Schistosoma japanicum Ts4 gene
  • 万方数据
    安徽医科大学学报 안휘의과대학학보
    ACTA UNIVERSITY MEDICINALIS ANHUI
    2007年 3期 262-264 ,共3页

    潘丽红%朱绍春%任翠平%王晓楠%赵志荣%刘淼%汪学龙%沈际佳

    반려홍%주소춘%임취평%왕효남%조지영%류묘%왕학룡%침제가

    血吸虫,日本/免疫学%克隆,分子%质粒/遗传学 血吸蟲,日本/免疫學%剋隆,分子%質粒/遺傳學
    혈흡충,일본/면역학%극륭,분자%질립/유전학
    目的 为了寻找血吸虫病新的免疫学诊断候选分子,在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫Sj-Ts4样融合蛋白.方法 提取日本血吸虫成虫RNA,设计引物,用RT-PCR法扩增出日本血吸虫Sj-Ts4样蛋白基因编码序列,T载体连接,将其亚克隆入PGEX-5X-1载体中,经酶切、测序证实正确后,转化入大肠杆菌DH5α并用IPTG对该重组菌诱导表达,SDS-PAGE和Western blot方法观察表达结果.结果 RT-PCR法扩增出一条大小约为870 bp的片段,表达质粒PGEX-5X-1-SjTs4经双酶切和以该重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段,诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约58 ku大小的GST融合蛋白条带,并可与抗GST特异性抗体反应.结论 本实验成功地克隆了日本血吸虫Sj-Ts4样抗原的编码基因,并在原核细胞中进行表达,为进一步验证其免疫诊断价值奠定了基础.
    목적 위료심조혈흡충병신적면역학진단후선분자,재대장간균중고효표체일본혈흡충Sj-Ts4양융합단백.방법 제취일본혈흡충성충RNA,설계인물,용RT-PCR법확증출일본혈흡충Sj-Ts4양단백기인편마서렬,T재체련접,장기아극륭입PGEX-5X-1재체중,경매절、측서증실정학후,전화입대장간균DH5α병용IPTG대해중조균유도표체,SDS-PAGE화Western blot방법관찰표체결과.결과 RT-PCR법확증출일조대소약위870 bp적편단,표체질립PGEX-5X-1-SjTs4경쌍매절화이해중조질립위모판진행PCR확증,균가획득일조여PCR산물일치적DNA편단,유도표체후,경SDS-PAGE가견일조약58 ku대소적GST융합단백조대,병가여항GST특이성항체반응.결론 본실험성공지극륭료일본혈흡충Sj-Ts4양항원적편마기인,병재원핵세포중진행표체,위진일보험증기면역진단개치전정료기출.
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