家畜生态学报
傢畜生態學報
가축생태학보
ACTA ECOLOGAE ANIMALIS DOMASTICI
2008年
3期
24-27
,共4页
串联%抑制素%基因克隆%重组质粒
串聯%抑製素%基因剋隆%重組質粒
천련%억제소%기인극륭%중조질립
根据GenBank中报道的猪抑制素基因序列设计两对引物,克隆含有抑制素抗原决定簇基因片段α(1～32)的plINH和p2INH,在这两个片段中都设有限制性内切酶Xba Ⅰ的酶切位点,通过Xba Ⅰ把p1INH与p2INH串联起来.串联抑制素基因片段与pcDNA3.1载体通过EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位点连接后经过转化DH5α感受态细菌构建重组栽体.以重组载体作为模板,以含有EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位点的引物进行PCR,产物经验证为含串联的抑制素基因.串联的抑制素基因产生的融合蛋白具有抑制素的免疫原性,且不会与体内其他蛋白发生免疫交叉反应.串联后的基因片段在单位体积内的抗原位点数增多,免疫效果也会加强.可以反馈性地抑制FSH的分泌,提高母畜的排卵数,提高产仔数.
根據GenBank中報道的豬抑製素基因序列設計兩對引物,剋隆含有抑製素抗原決定簇基因片段α(1～32)的plINH和p2INH,在這兩箇片段中都設有限製性內切酶Xba Ⅰ的酶切位點,通過Xba Ⅰ把p1INH與p2INH串聯起來.串聯抑製素基因片段與pcDNA3.1載體通過EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位點連接後經過轉化DH5α感受態細菌構建重組栽體.以重組載體作為模闆,以含有EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切位點的引物進行PCR,產物經驗證為含串聯的抑製素基因.串聯的抑製素基因產生的融閤蛋白具有抑製素的免疫原性,且不會與體內其他蛋白髮生免疫交扠反應.串聯後的基因片段在單位體積內的抗原位點數增多,免疫效果也會加彊.可以反饋性地抑製FSH的分泌,提高母畜的排卵數,提高產仔數.
근거GenBank중보도적저억제소기인서렬설계량대인물,극륭함유억제소항원결정족기인편단α(1～32)적plINH화p2INH,재저량개편단중도설유한제성내절매Xba Ⅰ적매절위점,통과Xba Ⅰ파p1INH여p2INH천련기래.천련억제소기인편단여pcDNA3.1재체통과EcoR Ⅰ、HindⅢ매절위점련접후경과전화DH5α감수태세균구건중조재체.이중조재체작위모판,이함유EcoR Ⅰ、HindⅢ매절위점적인물진행PCR,산물경험증위함천련적억제소기인.천련적억제소기인산생적융합단백구유억제소적면역원성,차불회여체내기타단백발생면역교차반응.천련후적기인편단재단위체적내적항원위점수증다,면역효과야회가강.가이반궤성지억제FSH적분비,제고모축적배란수,제고산자수.
