福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2009年
2期
142-144
,共3页
受体,LH%绒毛膜促性腺激素%乳腺肿瘤%克隆细胞%遗传载体%基因表达RNA,信使
受體,LH%絨毛膜促性腺激素%乳腺腫瘤%剋隆細胞%遺傳載體%基因錶達RNA,信使
수체,LH%융모막촉성선격소%유선종류%극륭세포%유전재체%기인표체RNA,신사
目的 构建黄体生成素受体(LHR)真核表达质粒载体和建立稳定高表达LHR的乳腺癌细胞株.方法 KpnⅠ/HpaⅠ双酶切LHR-cDNA质粒载体获得目的基因,定向克隆构建pcDNA3.1(+)真核表达载体,酶切图谱和序列分析鉴定;重组质粒载体经脂质体转染MCF-7乳腺癌细胞,G418筛选,RT-PCR、细胞内cAMP测定,筛选鉴定高表达LHR MCF-7细胞.结果 重组质粒pcDNA3.1(+)-LHR酶切图谱分析结果、序列分析证明pcDNA3.1(+)-LHR载体中LHR序列与GenBank的LHR基因序列完全相符.RT-PCR检测MCF-7细胞LHR mRNA,MCF-7细胞内cAMP浓度测定,证实MCF-7细胞高表达LHR.结论 构建并转染pcDNA3.1(+)-LHR真核表达载体,在MCF-7细胞中稳定表达,为探讨hCG对乳腺癌细胞的作用提供实验基础.
目的 構建黃體生成素受體(LHR)真覈錶達質粒載體和建立穩定高錶達LHR的乳腺癌細胞株.方法 KpnⅠ/HpaⅠ雙酶切LHR-cDNA質粒載體穫得目的基因,定嚮剋隆構建pcDNA3.1(+)真覈錶達載體,酶切圖譜和序列分析鑒定;重組質粒載體經脂質體轉染MCF-7乳腺癌細胞,G418篩選,RT-PCR、細胞內cAMP測定,篩選鑒定高錶達LHR MCF-7細胞.結果 重組質粒pcDNA3.1(+)-LHR酶切圖譜分析結果、序列分析證明pcDNA3.1(+)-LHR載體中LHR序列與GenBank的LHR基因序列完全相符.RT-PCR檢測MCF-7細胞LHR mRNA,MCF-7細胞內cAMP濃度測定,證實MCF-7細胞高錶達LHR.結論 構建併轉染pcDNA3.1(+)-LHR真覈錶達載體,在MCF-7細胞中穩定錶達,為探討hCG對乳腺癌細胞的作用提供實驗基礎.
목적 구건황체생성소수체(LHR)진핵표체질립재체화건립은정고표체LHR적유선암세포주.방법 KpnⅠ/HpaⅠ쌍매절LHR-cDNA질립재체획득목적기인,정향극륭구건pcDNA3.1(+)진핵표체재체,매절도보화서렬분석감정;중조질립재체경지질체전염MCF-7유선암세포,G418사선,RT-PCR、세포내cAMP측정,사선감정고표체LHR MCF-7세포.결과 중조질립pcDNA3.1(+)-LHR매절도보분석결과、서렬분석증명pcDNA3.1(+)-LHR재체중LHR서렬여GenBank적LHR기인서렬완전상부.RT-PCR검측MCF-7세포LHR mRNA,MCF-7세포내cAMP농도측정,증실MCF-7세포고표체LHR.결론 구건병전염pcDNA3.1(+)-LHR진핵표체재체,재MCF-7세포중은정표체,위탐토hCG대유선암세포적작용제공실험기출.
