草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2012年
1期
296-301
,共6页
霍松%陈慧%朱琼华%解新明
霍鬆%陳慧%硃瓊華%解新明
곽송%진혜%주경화%해신명
象草%Gateway技术%4CL基因%RNAi%载体构建
象草%Gateway技術%4CL基因%RNAi%載體構建
상초%Gateway기술%4CL기인%RNAi%재체구건
象草是热带和亚热带地区广泛栽培的多年生资源植物.为探讨华南象草4-香豆酸:CoA连接酶(4CL)基因下调表达对木质素合成的影响,本研究设计1对特异引物,PCR扩增获得一段长为374 bp的干扰片段.通过TOPO克隆,将该片段克隆到载体pCR /GW/TOPO,构建了入门克隆载体pENTR-4CL;再经过LR反应使pENTR-4CL上的干扰片段进入目的载体pCB2004B上,形成表达载体pCB2004B-4CL,最后通过冻融法将其转入到根癌农杆菌EHA105中.菌液PCR结果表明RNAi质粒已成功转入农杆菌,为进一步利用RNAi技术研究4CL基因的功能奠定了基础.
象草是熱帶和亞熱帶地區廣汎栽培的多年生資源植物.為探討華南象草4-香豆痠:CoA連接酶(4CL)基因下調錶達對木質素閤成的影響,本研究設計1對特異引物,PCR擴增穫得一段長為374 bp的榦擾片段.通過TOPO剋隆,將該片段剋隆到載體pCR /GW/TOPO,構建瞭入門剋隆載體pENTR-4CL;再經過LR反應使pENTR-4CL上的榦擾片段進入目的載體pCB2004B上,形成錶達載體pCB2004B-4CL,最後通過凍融法將其轉入到根癌農桿菌EHA105中.菌液PCR結果錶明RNAi質粒已成功轉入農桿菌,為進一步利用RNAi技術研究4CL基因的功能奠定瞭基礎.
상초시열대화아열대지구엄범재배적다년생자원식물.위탐토화남상초4-향두산:CoA련접매(4CL)기인하조표체대목질소합성적영향,본연구설계1대특이인물,PCR확증획득일단장위374 bp적간우편단.통과TOPO극륭,장해편단극륭도재체pCR /GW/TOPO,구건료입문극륭재체pENTR-4CL;재경과LR반응사pENTR-4CL상적간우편단진입목적재체pCB2004B상,형성표체재체pCB2004B-4CL,최후통과동융법장기전입도근암농간균EHA105중.균액PCR결과표명RNAi질립이성공전입농간균,위진일보이용RNAi기술연구4CL기인적공능전정료기출.
