蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2012年
2期
192-198
,共7页
刘赵越%童伟%张英华%方荣俊%赵卫国%李龙
劉趙越%童偉%張英華%方榮俊%趙衛國%李龍
류조월%동위%장영화%방영준%조위국%리룡
桑树%Ca2+/H+反向转运体蛋白%基因克隆%序列特征%基因表达
桑樹%Ca2+/H+反嚮轉運體蛋白%基因剋隆%序列特徵%基因錶達
상수%Ca2+/H+반향전운체단백%기인극륭%서렬특정%기인표체
植物体内的Ca2+/H+反向转运体在Ca2+介导的营养和信号转导中发挥着重要作用.选择桑树幼叶cDNA文库中功能注释为Ca2+/H+反向转运体基因(CAX)的一条EST序列设计引物,通过cDNA末端快速扩增(RACE)与反转录PCR( RTPCR)在桑品种育71-1的幼叶中克隆获得该基因的全长cDNA序列,命名为MCAX-1(GenBank登录号:JN716318).序列分析显示:MCAX-1全长1 784 bp,包括197 bp的5’端非翻译序列和243 bp的3’端非翻译序列,含有一个1 344bp的完整ORF,编码447个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量为47.93 kD,等电点为5.67.构建的桑树和其它植物基于CAX蛋白氨基酸序列的系统进化树显示:桑树与盐地碱蓬(Suaeda salsa)、毛果扬(Populus trichocarpa)、蓖麻(Ricinus communis)等有较近的亲缘关系.半定量RT-PCR分析表明:MCAX-1在桑树幼芽、嫩叶、根和幼花中的表达量较高,在韧皮部、木质部和成熟果实中的表达量较低；MCAX-1在低温胁迫下的表达量减少,-1℃时几乎无表达,在干旱胁迫下的表达量随着胁迫时间延长逐渐达到最大值之后又迅速降低,在盐分胁迫初期的表达量无变化,但胁迫18d时表达量明显降低.初步推测MCAX-1与桑树的抗逆性能有一定关联.
植物體內的Ca2+/H+反嚮轉運體在Ca2+介導的營養和信號轉導中髮揮著重要作用.選擇桑樹幼葉cDNA文庫中功能註釋為Ca2+/H+反嚮轉運體基因(CAX)的一條EST序列設計引物,通過cDNA末耑快速擴增(RACE)與反轉錄PCR( RTPCR)在桑品種育71-1的幼葉中剋隆穫得該基因的全長cDNA序列,命名為MCAX-1(GenBank登錄號:JN716318).序列分析顯示:MCAX-1全長1 784 bp,包括197 bp的5’耑非翻譯序列和243 bp的3’耑非翻譯序列,含有一箇1 344bp的完整ORF,編碼447箇氨基痠殘基,預測蛋白質分子質量為47.93 kD,等電點為5.67.構建的桑樹和其它植物基于CAX蛋白氨基痠序列的繫統進化樹顯示:桑樹與鹽地堿蓬(Suaeda salsa)、毛果颺(Populus trichocarpa)、蓖痳(Ricinus communis)等有較近的親緣關繫.半定量RT-PCR分析錶明:MCAX-1在桑樹幼芽、嫩葉、根和幼花中的錶達量較高,在韌皮部、木質部和成熟果實中的錶達量較低；MCAX-1在低溫脅迫下的錶達量減少,-1℃時幾乎無錶達,在榦旱脅迫下的錶達量隨著脅迫時間延長逐漸達到最大值之後又迅速降低,在鹽分脅迫初期的錶達量無變化,但脅迫18d時錶達量明顯降低.初步推測MCAX-1與桑樹的抗逆性能有一定關聯.
식물체내적Ca2+/H+반향전운체재Ca2+개도적영양화신호전도중발휘착중요작용.선택상수유협cDNA문고중공능주석위Ca2+/H+반향전운체기인(CAX)적일조EST서렬설계인물,통과cDNA말단쾌속확증(RACE)여반전록PCR( RTPCR)재상품충육71-1적유협중극륭획득해기인적전장cDNA서렬,명명위MCAX-1(GenBank등록호:JN716318).서렬분석현시:MCAX-1전장1 784 bp,포괄197 bp적5’단비번역서렬화243 bp적3’단비번역서렬,함유일개1 344bp적완정ORF,편마447개안기산잔기,예측단백질분자질량위47.93 kD,등전점위5.67.구건적상수화기타식물기우CAX단백안기산서렬적계통진화수현시:상수여염지감봉(Suaeda salsa)、모과양(Populus trichocarpa)、비마(Ricinus communis)등유교근적친연관계.반정량RT-PCR분석표명:MCAX-1재상수유아、눈협、근화유화중적표체량교고,재인피부、목질부화성숙과실중적표체량교저；MCAX-1재저온협박하적표체량감소,-1℃시궤호무표체,재간한협박하적표체량수착협박시간연장축점체도최대치지후우신속강저,재염분협박초기적표체량무변화,단협박18d시표체량명현강저.초보추측MCAX-1여상수적항역성능유일정관련.
