中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2012年
6期
324-331
,共8页
表皮生长因子受体%肺肿瘤%辐射耐受性%吉非替尼
錶皮生長因子受體%肺腫瘤%輻射耐受性%吉非替尼
표피생장인자수체%폐종류%복사내수성%길비체니
背景与目的 表皮生长因子受体( epidermal growth factor receptor,EGFR)是决定放疗效应的一个重要因素,其过表达或是下游通路的激活与包括非小细胞肺癌在内的肿瘤的放疗抵抗相关,因而阻断EGFR的信号通路可能会增强放疗敏感性.本研究旨在探讨小分子EGFR酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼能否增加肺癌细胞株HCC827和H358的放疗敏感性及其能的机制.方法 选取HCC827和H358这两个非小细胞肺癌细胞株,分为单纯X线组和X线+吉非替尼两组.单纯X线组采用单纯X线照射,X线+吉非替尼组经1 μmol/L吉非替尼作用24 h后再行X线照射.克隆形成实验比较两株细胞中不同分组细胞放射敏感性,免疫荧光激光共聚焦显微镜观察X线照射后各时间点细胞核中的磷酸化H2AX(γ-H2AX)及EGFR焦点在细胞中的定位情况,Western blot法检洲放疗后胞质胞核蛋白中EGFR的表达.结果 克隆形成实验中.H358细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.355和0.433; HCC827细胞实验组与对照组在各放疗剂量点的SF2值分别为0.223和0.242,差别不明显.激光共聚焦显微镜观察照射4 Gy后各时间段实验组H358细胞核中g-H2AX斑点相比对照组要多,且持续时间更长.而对照组和实验组的HCC827细胞g-H2AX斑点在各时间段并无明显差异;激光共聚焦显微镜观察照射4 Gy后对照组H358的EGFR蛋白在1h内入核,而经吉非替尼处理后EGFR蛋白几乎不入核;实验组及对照组HCC827细胞的EGFR表达位置均在细胞质中,胞核中很少或者没有,可以认为并无入核现象;Western blot结果显示,H358细胞在经4Gy放射处理后有入核现象,而预先经吉非替尼处理后,EGFR蛋白几乎不存核内表达而仍位于细胞浆内.对于HCC827细胞,实验组及对照组的EGFR蛋白均在细胞质中表达,胞核中很少或没有,且两组并无明显差异.结论 吉非替尼可增加肺癌细胞株H358的放射敏感性,这可能与其阻止放疗后EGFR入核、影响放疗后双链断裂(double strand break,DSB)修复有关;而对HCC827细胞无影响,可能与其放疗后EGFR不入核相关.
揹景與目的 錶皮生長因子受體( epidermal growth factor receptor,EGFR)是決定放療效應的一箇重要因素,其過錶達或是下遊通路的激活與包括非小細胞肺癌在內的腫瘤的放療牴抗相關,因而阻斷EGFR的信號通路可能會增彊放療敏感性.本研究旨在探討小分子EGFR酪氨痠激酶抑製劑吉非替尼能否增加肺癌細胞株HCC827和H358的放療敏感性及其能的機製.方法 選取HCC827和H358這兩箇非小細胞肺癌細胞株,分為單純X線組和X線+吉非替尼兩組.單純X線組採用單純X線照射,X線+吉非替尼組經1 μmol/L吉非替尼作用24 h後再行X線照射.剋隆形成實驗比較兩株細胞中不同分組細胞放射敏感性,免疫熒光激光共聚焦顯微鏡觀察X線照射後各時間點細胞覈中的燐痠化H2AX(γ-H2AX)及EGFR焦點在細胞中的定位情況,Western blot法檢洲放療後胞質胞覈蛋白中EGFR的錶達.結果 剋隆形成實驗中.H358細胞實驗組與對照組在各放療劑量點的SF2值分彆為0.355和0.433; HCC827細胞實驗組與對照組在各放療劑量點的SF2值分彆為0.223和0.242,差彆不明顯.激光共聚焦顯微鏡觀察照射4 Gy後各時間段實驗組H358細胞覈中g-H2AX斑點相比對照組要多,且持續時間更長.而對照組和實驗組的HCC827細胞g-H2AX斑點在各時間段併無明顯差異;激光共聚焦顯微鏡觀察照射4 Gy後對照組H358的EGFR蛋白在1h內入覈,而經吉非替尼處理後EGFR蛋白幾乎不入覈;實驗組及對照組HCC827細胞的EGFR錶達位置均在細胞質中,胞覈中很少或者沒有,可以認為併無入覈現象;Western blot結果顯示,H358細胞在經4Gy放射處理後有入覈現象,而預先經吉非替尼處理後,EGFR蛋白幾乎不存覈內錶達而仍位于細胞漿內.對于HCC827細胞,實驗組及對照組的EGFR蛋白均在細胞質中錶達,胞覈中很少或沒有,且兩組併無明顯差異.結論 吉非替尼可增加肺癌細胞株H358的放射敏感性,這可能與其阻止放療後EGFR入覈、影響放療後雙鏈斷裂(double strand break,DSB)脩複有關;而對HCC827細胞無影響,可能與其放療後EGFR不入覈相關.
배경여목적 표피생장인자수체( epidermal growth factor receptor,EGFR)시결정방료효응적일개중요인소,기과표체혹시하유통로적격활여포괄비소세포폐암재내적종류적방료저항상관,인이조단EGFR적신호통로가능회증강방료민감성.본연구지재탐토소분자EGFR락안산격매억제제길비체니능부증가폐암세포주HCC827화H358적방료민감성급기능적궤제.방법 선취HCC827화H358저량개비소세포폐암세포주,분위단순X선조화X선+길비체니량조.단순X선조채용단순X선조사,X선+길비체니조경1 μmol/L길비체니작용24 h후재행X선조사.극륭형성실험비교량주세포중불동분조세포방사민감성,면역형광격광공취초현미경관찰X선조사후각시간점세포핵중적린산화H2AX(γ-H2AX)급EGFR초점재세포중적정위정황,Western blot법검주방료후포질포핵단백중EGFR적표체.결과 극륭형성실험중.H358세포실험조여대조조재각방료제량점적SF2치분별위0.355화0.433; HCC827세포실험조여대조조재각방료제량점적SF2치분별위0.223화0.242,차별불명현.격광공취초현미경관찰조사4 Gy후각시간단실험조H358세포핵중g-H2AX반점상비대조조요다,차지속시간경장.이대조조화실험조적HCC827세포g-H2AX반점재각시간단병무명현차이;격광공취초현미경관찰조사4 Gy후대조조H358적EGFR단백재1h내입핵,이경길비체니처리후EGFR단백궤호불입핵;실험조급대조조HCC827세포적EGFR표체위치균재세포질중,포핵중흔소혹자몰유,가이인위병무입핵현상;Western blot결과현시,H358세포재경4Gy방사처리후유입핵현상,이예선경길비체니처리후,EGFR단백궤호불존핵내표체이잉위우세포장내.대우HCC827세포,실험조급대조조적EGFR단백균재세포질중표체,포핵중흔소혹몰유,차량조병무명현차이.결론 길비체니가증가폐암세포주H358적방사민감성,저가능여기조지방료후EGFR입핵、영향방료후쌍련단렬(double strand break,DSB)수복유관;이대HCC827세포무영향,가능여기방료후EGFR불입핵상관.
