临床输血与检验
臨床輸血與檢驗
림상수혈여검험
JOURNAL OF CLINICAL TRANSFUSION AND LABORATORY MEDICINE
2006年
1期
1-4
,共4页
谈意隽%周彩存%唐亮%刘岽%曾宪卓%孙宏彬%张钥%季育华
談意雋%週綵存%唐亮%劉崠%曾憲卓%孫宏彬%張鑰%季育華
담의준%주채존%당량%류동%증헌탁%손굉빈%장약%계육화
噬菌体展示%巨细胞病毒%PP65%抗原表位
噬菌體展示%巨細胞病毒%PP65%抗原錶位
서균체전시%거세포병독%PP65%항원표위
目的利用噬菌体展示技术构建巨细胞病毒基质蛋白PP65的抗原,初步评价其抗原性.方法 PP65的基因片段经酶切后,与T7噬菌体的基因组相应酶切位点结合,借助包装蛋白组装成为完整的噬菌体.PP65目的蛋白以融合蛋白的形式表达在T7噬菌体的头蛋白部位,每个噬菌体颗粒表面可表达5～15个拷贝.噬菌体可以在宿主细胞中快速繁殖,并且能够迅速裂解宿主细胞,使目的蛋白的富集达到很高的效率.人巨细胞病毒基质蛋白PP65可以激发机体强烈的免疫反应,运用T7噬菌体载体展示系统表达PP65的部分肽段,扩增噬菌体,以SDS-PAGE电泳和western-blot鉴定所表达的抗原特性.结果获得了重组T7-PP65噬菌体,通过鉴定,噬菌体表达在其头蛋白上的PP65抗原可以被天然PP65的单克隆抗体所识别.结论噬菌体展示技术可以有效地进行病毒蛋白抗原的表达,为抗原筛选和疫苗的研制提供科学依据.将PP65表达在T7噬菌体表面,可以研究其免疫原性及评估其作为疫苗的可能性.
目的利用噬菌體展示技術構建巨細胞病毒基質蛋白PP65的抗原,初步評價其抗原性.方法 PP65的基因片段經酶切後,與T7噬菌體的基因組相應酶切位點結閤,藉助包裝蛋白組裝成為完整的噬菌體.PP65目的蛋白以融閤蛋白的形式錶達在T7噬菌體的頭蛋白部位,每箇噬菌體顆粒錶麵可錶達5～15箇拷貝.噬菌體可以在宿主細胞中快速繁殖,併且能夠迅速裂解宿主細胞,使目的蛋白的富集達到很高的效率.人巨細胞病毒基質蛋白PP65可以激髮機體彊烈的免疫反應,運用T7噬菌體載體展示繫統錶達PP65的部分肽段,擴增噬菌體,以SDS-PAGE電泳和western-blot鑒定所錶達的抗原特性.結果穫得瞭重組T7-PP65噬菌體,通過鑒定,噬菌體錶達在其頭蛋白上的PP65抗原可以被天然PP65的單剋隆抗體所識彆.結論噬菌體展示技術可以有效地進行病毒蛋白抗原的錶達,為抗原篩選和疫苗的研製提供科學依據.將PP65錶達在T7噬菌體錶麵,可以研究其免疫原性及評估其作為疫苗的可能性.
목적이용서균체전시기술구건거세포병독기질단백PP65적항원,초보평개기항원성.방법 PP65적기인편단경매절후,여T7서균체적기인조상응매절위점결합,차조포장단백조장성위완정적서균체.PP65목적단백이융합단백적형식표체재T7서균체적두단백부위,매개서균체과립표면가표체5～15개고패.서균체가이재숙주세포중쾌속번식,병차능구신속렬해숙주세포,사목적단백적부집체도흔고적효솔.인거세포병독기질단백PP65가이격발궤체강렬적면역반응,운용T7서균체재체전시계통표체PP65적부분태단,확증서균체,이SDS-PAGE전영화western-blot감정소표체적항원특성.결과획득료중조T7-PP65서균체,통과감정,서균체표체재기두단백상적PP65항원가이피천연PP65적단극륭항체소식별.결론서균체전시기술가이유효지진행병독단백항원적표체,위항원사선화역묘적연제제공과학의거.장PP65표체재T7서균체표면,가이연구기면역원성급평고기작위역묘적가능성.
