CAJ | 학술논문

为研究霍乱弧菌体内感染机制,寻找新的抗霍乱药物靶标和候选疫苗.以转座子上无启动子的kan-rpsL融合基因作为体内外双重抗生素报告基因,通过与霍乱弧菌埃尔托型C6706接合建立转座子突变库,经体内外各两轮筛选,获得对卡那霉素(Kan)体内抗性体外敏感、链霉素(Str)体外抗性体内敏感的突变株,即转座子插入位点上游包含了能够在体内被诱导激活的启动子.初步建立了筛选霍乱弧菌体内诱导表达基因的成年小鼠模型,最终获得5株阳性克隆.对转座子插入位点进行序列分析,分别为编码渗透敏感型钾离子通道组氨酸激酶的kdpD,谷氨酸合酶大亚基的gltB1,亮氨酰氨基肽酶的pepB以及核苷渗透酶的nupC.对kdpD基因融合lacZ报告基因进行表达调控研究,发现该基因在LB和霍乱毒素诱导培养基AKI中不能被诱导表达.以上结果表明霍乱弧菌通过调节氨基酸及核酸代谢,感知体内外环境来适应宿主体内环境的变化.
위연구곽란호균체내감염궤제,심조신적항곽란약물파표화후선역묘.이전좌자상무계동자적kan-rpsL융합기인작위체내외쌍중항생소보고기인,통과여곽란호균애이탁형C6706접합건립전좌자돌변고,경체내외각량륜사선,획득대잡나매소(Kan)체내항성체외민감、련매소(Str)체외항성체내민감적돌변주,즉전좌자삽입위점상유포함료능구재체내피유도격활적계동자.초보건립료사선곽란호균체내유도표체기인적성년소서모형,최종획득5주양성극륭.대전좌자삽입위점진행서렬분석,분별위편마삼투민감형갑리자통도조안산격매적kdpD,곡안산합매대아기적gltB1,량안선안기태매적pepB이급핵감삼투매적nupC.대kdpD기인융합lacZ보고기인진행표체조공연구,발현해기인재LB화곽란독소유도배양기AKI중불능피유도표체.이상결과표명곽란호균통과조절안기산급핵산대사,감지체내외배경래괄응숙주체내배경적변화.