遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2011年
9期
989-995
,共7页
倪丽菊%陶凌云%柏熊%胡建华%高诚%谢建云
倪麗菊%陶凌雲%柏熊%鬍建華%高誠%謝建雲
예려국%도릉운%백웅%호건화%고성%사건운
东方田鼠%磁珠富集%微卫星标记%遗传多样性
東方田鼠%磁珠富集%微衛星標記%遺傳多樣性
동방전서%자주부집%미위성표기%유전다양성
根据生物素与链霉亲和素的亲和原理,利用磁珠富集法筛选东方田鼠(Microtus fortis)微卫星分子标记.链霉亲和素磁珠捕获生物素标记的微卫星探针,然后与连有接头的单链限制性酶切片段复性结合,获得含有微卫星的单链片段,PCR扩增形成双链,连接T载体并转化感受态细胞,得到东方田鼠微卫星富集文库.随机挑选70个阳性克隆,经测序分析,获得微卫星序列92个.设计合成27对微卫星引物并成功筛选出21对可用引物,取其中10对引物,荧光标记后对3个人工驯养及野生东方田鼠种群进行遗传多样性分析.结果显示,文章所构建的东方田鼠微卫星文库的阳性克隆率较高,初步筛选的10个微卫星标记均为具有高度多态性的微卫星标记.在3个东方田鼠种群中,野生湖南种群的观测等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和多态信息含量(PIC)均最高,人工驯养的湖南种群次之,人工驯养的宁夏种群最低.
根據生物素與鏈黴親和素的親和原理,利用磁珠富集法篩選東方田鼠(Microtus fortis)微衛星分子標記.鏈黴親和素磁珠捕穫生物素標記的微衛星探針,然後與連有接頭的單鏈限製性酶切片段複性結閤,穫得含有微衛星的單鏈片段,PCR擴增形成雙鏈,連接T載體併轉化感受態細胞,得到東方田鼠微衛星富集文庫.隨機挑選70箇暘性剋隆,經測序分析,穫得微衛星序列92箇.設計閤成27對微衛星引物併成功篩選齣21對可用引物,取其中10對引物,熒光標記後對3箇人工馴養及野生東方田鼠種群進行遺傳多樣性分析.結果顯示,文章所構建的東方田鼠微衛星文庫的暘性剋隆率較高,初步篩選的10箇微衛星標記均為具有高度多態性的微衛星標記.在3箇東方田鼠種群中,野生湖南種群的觀測等位基因數(Na)、有效等位基因數(Ne)、觀測雜閤度(Ho)、期望雜閤度(He)和多態信息含量(PIC)均最高,人工馴養的湖南種群次之,人工馴養的寧夏種群最低.
근거생물소여련매친화소적친화원리,이용자주부집법사선동방전서(Microtus fortis)미위성분자표기.련매친화소자주포획생물소표기적미위성탐침,연후여련유접두적단련한제성매절편단복성결합,획득함유미위성적단련편단,PCR확증형성쌍련,련접T재체병전화감수태세포,득도동방전서미위성부집문고.수궤도선70개양성극륭,경측서분석,획득미위성서렬92개.설계합성27대미위성인물병성공사선출21대가용인물,취기중10대인물,형광표기후대3개인공순양급야생동방전서충군진행유전다양성분석.결과현시,문장소구건적동방전서미위성문고적양성극륭솔교고,초보사선적10개미위성표기균위구유고도다태성적미위성표기.재3개동방전서충군중,야생호남충군적관측등위기인수(Na)、유효등위기인수(Ne)、관측잡합도(Ho)、기망잡합도(He)화다태신식함량(PIC)균최고,인공순양적호남충군차지,인공순양적저하충군최저.
