塔里木大学学报
塔裏木大學學報
탑리목대학학보
JOURNAL OF TARIM UNIVERSITY
2012年
2期
7-13
,共7页
乳房链球菌%gapC基因%原核表达
乳房鏈毬菌%gapC基因%原覈錶達
유방련구균%gapC기인%원핵표체
为获得乳房链球菌(Streptococcus uberis)gapC基因的原核表达载体,通过PCR方法扩增出新疆南疆地区奶牛乳房链球菌临床分离株的gapC基因,并克隆到原核表达载体pET32a(+)中,构建了重组质粒pET32a(+)- gapC,将重组质粒转化宿主菌E.coli BL21进行重组蛋白的表达.实验结果表明,IPTG诱导5～9h均可获得大量重组蛋白.重组蛋白分子量约为54.0 kD,介于43 kD～66.2 kD之间,与预期大小一致,说明表达载体构建成功.通过优化最佳诱导条件,获得乳房链球菌gapC基因重组蛋白的最佳诱导条件为0.5 mmol/L IPTG诱导6h即可获得大量重组蛋白,为进一步确定蛋白的免疫保护性和制备疫苗奠定了基础.
為穫得乳房鏈毬菌(Streptococcus uberis)gapC基因的原覈錶達載體,通過PCR方法擴增齣新疆南疆地區奶牛乳房鏈毬菌臨床分離株的gapC基因,併剋隆到原覈錶達載體pET32a(+)中,構建瞭重組質粒pET32a(+)- gapC,將重組質粒轉化宿主菌E.coli BL21進行重組蛋白的錶達.實驗結果錶明,IPTG誘導5～9h均可穫得大量重組蛋白.重組蛋白分子量約為54.0 kD,介于43 kD～66.2 kD之間,與預期大小一緻,說明錶達載體構建成功.通過優化最佳誘導條件,穫得乳房鏈毬菌gapC基因重組蛋白的最佳誘導條件為0.5 mmol/L IPTG誘導6h即可穫得大量重組蛋白,為進一步確定蛋白的免疫保護性和製備疫苗奠定瞭基礎.
위획득유방련구균(Streptococcus uberis)gapC기인적원핵표체재체,통과PCR방법확증출신강남강지구내우유방련구균림상분리주적gapC기인,병극륭도원핵표체재체pET32a(+)중,구건료중조질립pET32a(+)- gapC,장중조질립전화숙주균E.coli BL21진행중조단백적표체.실험결과표명,IPTG유도5～9h균가획득대량중조단백.중조단백분자량약위54.0 kD,개우43 kD～66.2 kD지간,여예기대소일치,설명표체재체구건성공.통과우화최가유도조건,획득유방련구균gapC기인중조단백적최가유도조건위0.5 mmol/L IPTG유도6h즉가획득대량중조단백,위진일보학정단백적면역보호성화제비역묘전정료기출.
