生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2002年
6期
667-670
,共4页
刘丽%刘谨%仇润祥%朱兴国%唐国敏
劉麗%劉謹%仇潤祥%硃興國%唐國敏
류려%류근%구윤상%주흥국%당국민
黑曲霉T21%蛋白酶缺陷株%VHb%表达-分泌
黑麯黴T21%蛋白酶缺陷株%VHb%錶達-分泌
흑곡매T21%단백매결함주%VHb%표체-분비
黑曲霉糖化酶高产菌株T21经紫外诱变后, 通过酪蛋白平板和蛋白酶活性测定筛选出胞外酸性蛋白酶活力仅为原株0.76%的菌株A.nigerT21-201,其生长特性和产糖化酶活力与原株基本一致.利用原生质体-PEG法将含有报告基因vhb的表达分泌质粒pGT10- vhb通过与选择标记质粒的共转化导入此蛋白酶部分缺陷株及其原株T21,检测在蛋白酶缺陷株Aspergillus niger T21-201 和原株T21中VHb的分泌表达,结果表明在A.ni gerT21-201中VHb表达水平显著高于原株,但Northern blot却显示在两菌株中vnb基因的转录水平近似,由此证明酸性蛋白酶缺陷对保护外源蛋白产生了显著效果.
黑麯黴糖化酶高產菌株T21經紫外誘變後, 通過酪蛋白平闆和蛋白酶活性測定篩選齣胞外痠性蛋白酶活力僅為原株0.76%的菌株A.nigerT21-201,其生長特性和產糖化酶活力與原株基本一緻.利用原生質體-PEG法將含有報告基因vhb的錶達分泌質粒pGT10- vhb通過與選擇標記質粒的共轉化導入此蛋白酶部分缺陷株及其原株T21,檢測在蛋白酶缺陷株Aspergillus niger T21-201 和原株T21中VHb的分泌錶達,結果錶明在A.ni gerT21-201中VHb錶達水平顯著高于原株,但Northern blot卻顯示在兩菌株中vnb基因的轉錄水平近似,由此證明痠性蛋白酶缺陷對保護外源蛋白產生瞭顯著效果.
흑곡매당화매고산균주T21경자외유변후, 통과락단백평판화단백매활성측정사선출포외산성단백매활력부위원주0.76%적균주A.nigerT21-201,기생장특성화산당화매활력여원주기본일치.이용원생질체-PEG법장함유보고기인vhb적표체분비질립pGT10- vhb통과여선택표기질립적공전화도입차단백매부분결함주급기원주T21,검측재단백매결함주Aspergillus niger T21-201 화원주T21중VHb적분비표체,결과표명재A.ni gerT21-201중VHb표체수평현저고우원주,단Northern blot각현시재량균주중vnb기인적전록수평근사,유차증명산성단백매결함대보호외원단백산생료현저효과.
