上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2006年
2期
151-154
,共4页
张小爱%侍庆%吴华成%曹文俊%孙顺昌%倪培华%樊绮诗
張小愛%侍慶%吳華成%曹文俊%孫順昌%倪培華%樊綺詩
장소애%시경%오화성%조문준%손순창%예배화%번기시
小干扰RNA%RAB5A%RABEX5%pSilencer载体%HO-8910PM细胞系
小榦擾RNA%RAB5A%RABEX5%pSilencer載體%HO-8910PM細胞繫
소간우RNA%RAB5A%RABEX5%pSilencer재체%HO-8910PM세포계
目的 研究内源性的siRNA对RAB5A和RABEX5表达的抑制作用.方法 利用siRNA表达载体 pSilencerTM 2.1U6-neo对RAB5A和RABEX5基因分别构建3个特异的siRNA表达载体,并将表达载体分别转染人卵巢癌高转移细胞HO-8910PM.应用逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测转染前后HO-8910PM细胞中RAB5A和RABEX5的表达情况,并用荧光免疫细胞化学技术对干扰效率最好的载体进行验证.结果 在构建的6个siRNA表达载体中, pSilencer/siRAB5A-1和pSilencer/siRAB5A-2对RAB5A表达的抑制率分别为90%和70%,pSilencer/siRAB5A-3对RAB5A表达没有抑制作用.pSilencer/siRABEX5-1、pSilencer/siRABEX5-2和pSilencer/siRABEX5-3对RABEX5表达的抑制率分别为30%、50%和90%.结论 成功构建了对RAB5A和RABEX5表达具有抑制作用的siRNA表达载体,为进一步研究RAB5A和RABEX5的生物学功能提供了实验工具.
目的 研究內源性的siRNA對RAB5A和RABEX5錶達的抑製作用.方法 利用siRNA錶達載體 pSilencerTM 2.1U6-neo對RAB5A和RABEX5基因分彆構建3箇特異的siRNA錶達載體,併將錶達載體分彆轉染人卵巢癌高轉移細胞HO-8910PM.應用逆轉錄-聚閤酶鏈反應和蛋白印跡檢測轉染前後HO-8910PM細胞中RAB5A和RABEX5的錶達情況,併用熒光免疫細胞化學技術對榦擾效率最好的載體進行驗證.結果 在構建的6箇siRNA錶達載體中, pSilencer/siRAB5A-1和pSilencer/siRAB5A-2對RAB5A錶達的抑製率分彆為90%和70%,pSilencer/siRAB5A-3對RAB5A錶達沒有抑製作用.pSilencer/siRABEX5-1、pSilencer/siRABEX5-2和pSilencer/siRABEX5-3對RABEX5錶達的抑製率分彆為30%、50%和90%.結論 成功構建瞭對RAB5A和RABEX5錶達具有抑製作用的siRNA錶達載體,為進一步研究RAB5A和RABEX5的生物學功能提供瞭實驗工具.
목적 연구내원성적siRNA대RAB5A화RABEX5표체적억제작용.방법 이용siRNA표체재체 pSilencerTM 2.1U6-neo대RAB5A화RABEX5기인분별구건3개특이적siRNA표체재체,병장표체재체분별전염인란소암고전이세포HO-8910PM.응용역전록-취합매련반응화단백인적검측전염전후HO-8910PM세포중RAB5A화RABEX5적표체정황,병용형광면역세포화학기술대간우효솔최호적재체진행험증.결과 재구건적6개siRNA표체재체중, pSilencer/siRAB5A-1화pSilencer/siRAB5A-2대RAB5A표체적억제솔분별위90%화70%,pSilencer/siRAB5A-3대RAB5A표체몰유억제작용.pSilencer/siRABEX5-1、pSilencer/siRABEX5-2화pSilencer/siRABEX5-3대RABEX5표체적억제솔분별위30%、50%화90%.결론 성공구건료대RAB5A화RABEX5표체구유억제작용적siRNA표체재체,위진일보연구RAB5A화RABEX5적생물학공능제공료실험공구.
