CAJ | 학술논문

利用改良的农杆菌培养液、侵染液、共培养培养基和筛选培养基等技术体系,对4个玉米基因型Hi-Ⅱ、H99、国内2个优良自交系R18-599和齐319的新鲜幼胚、预培养幼胚、胚性愈伤组织进行了农杆菌转化研究,并比较了不同共培养方式对农杆菌侵染不同玉米组织的影响.结果表明,Hi-Ⅱ新鲜幼胚在固体培养基上共培养和滤纸上共培养后GUS基因瞬间表达率分别为83.7%和4.4%,前法优于后法;Hi-Ⅱ新鲜幼胚、预培养3 d的幼胚愈伤组织经农杆菌侵染后GUS基因瞬间表达率分别为83.7%和12.1%,新鲜幼胚比预培养的幼胚愈伤组织更适合于农杆菌转化.用上述优化的条件对另外3个不同基因型的2种不同外植体H99、齐319(新鲜幼胚)和R18-599(胚性愈伤组织)进行遗传转化,共培养3 d后的GUS基因瞬间表达率分别为65.2%、52.6%和58%,表明该转化体系适合于上述4种基因型的幼胚和胚性愈伤组织的遗传转化.此外农杆菌侵染Hi-Ⅱ新鲜幼胚后经在含巴龙霉素25～100 mg L-1培养基上3轮选择后,抗性愈伤组织获得率为2.4%,近似反映了本研究的遗传转化率.其他3个基因型的抗性愈伤也正在筛选中.结果初步表明,本研究建立的农杆菌介导的玉米遗传转化体系可能对4种基因型均适用.
이용개량적농간균배양액、침염액、공배양배양기화사선배양기등기술체계,대4개옥미기인형Hi-Ⅱ、H99、국내2개우량자교계R18-599화제319적신선유배、예배양유배、배성유상조직진행료농간균전화연구,병비교료불동공배양방식대농간균침염불동옥미조직적영향.결과표명,Hi-Ⅱ신선유배재고체배양기상공배양화려지상공배양후GUS기인순간표체솔분별위83.7%화4.4%,전법우우후법;Hi-Ⅱ신선유배、예배양3 d적유배유상조직경농간균침염후GUS기인순간표체솔분별위83.7%화12.1%,신선유배비예배양적유배유상조직경괄합우농간균전화.용상술우화적조건대령외3개불동기인형적2충불동외식체H99、제319(신선유배)화R18-599(배성유상조직)진행유전전화,공배양3 d후적GUS기인순간표체솔분별위65.2%、52.6%화58%,표명해전화체계괄합우상술4충기인형적유배화배성유상조직적유전전화.차외농간균침염Hi-Ⅱ신선유배후경재함파룡매소25～100 mg L-1배양기상3륜선택후,항성유상조직획득솔위2.4%,근사반영료본연구적유전전화솔.기타3개기인형적항성유상야정재사선중.결과초보표명,본연구건립적농간균개도적옥미유전전화체계가능대4충기인형균괄용.