逆转录病毒载体转染的人凝血因子Ⅸ基因在人脐带组织源间充质干细胞中的表达
역전록병독재체전염적인응혈인자Ⅸ기인재인제대조직원간충질간세포중적표체
Expression of Human Factor Ⅸ in Retrovirus-transfected Human Umbilical Cord Tissue Derived Mesenchymal Stem Cells
  • 万方数据
    中国实验血液学杂志 중국실험혈액학잡지
    JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
    2009年 1期 184-187 ,共4页

    陈晓梨%董春兰%冯小明%陈振萍%周泽平%许显辉%赵钦军%邱志勇%任倩%张蕾%韩忠朝

    진효리%동춘란%풍소명%진진평%주택평%허현휘%조흠군%구지용%임천%장뢰%한충조

    逆转录病毒%人凝血因子Ⅸ%人脐带组织源间充质干细胞%基因治疗%血友病B 逆轉錄病毒%人凝血因子Ⅸ%人臍帶組織源間充質榦細胞%基因治療%血友病B
    역전록병독%인응혈인자Ⅸ%인제대조직원간충질간세포%기인치료%혈우병B
    为了研究逆转录病毒(pLEGFP-N1)转染的人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)基因在人脐带间充质干细胞中的表达,应用DNA重组技术将hFⅨ cDNA构建入pLEGFP-N1载体,转导入包装细胞系Pheonix细胞,应用病毒上清感染人脐带组织源间充质干细胞(hUCT-MSCs),经G418筛选10天后获得全部的转染阳性细胞,从蛋白质水平和其功能活性上检测hFⅨ的表达.结果显示:配养上清液中可检测到hFⅨ的表达,每24小时分泌量达2.68±0.36μg/106细胞.Western blot检测表明,转导hFⅨ的hUCT-MSCs能分泌预期分子大小的hFⅨ入上清.功能性凝集测定实验表明了转导FⅨ的hUCT-MSCs 2天培养上清中hFⅨ的活性为100%-130%.结论:pLEGFP-N1-hFⅨ能有效地转导hUCT-MSCs,并在其子代细胞中表达具有凝血活性的hFⅨ,这为hUCT-MSCs成为血友病B基因治疗的细胞载体研究奠定了基础.
    위료연구역전록병독(pLEGFP-N1)전염적인응혈인자Ⅸ(hFⅨ)기인재인제대간충질간세포중적표체,응용DNA중조기술장hFⅨ cDNA구건입pLEGFP-N1재체,전도입포장세포계Pheonix세포,응용병독상청감염인제대조직원간충질간세포(hUCT-MSCs),경G418사선10천후획득전부적전염양성세포,종단백질수평화기공능활성상검측hFⅨ적표체.결과현시:배양상청액중가검측도hFⅨ적표체,매24소시분비량체2.68±0.36μg/106세포.Western blot검측표명,전도hFⅨ적hUCT-MSCs능분비예기분자대소적hFⅨ입상청.공능성응집측정실험표명료전도FⅨ적hUCT-MSCs 2천배양상청중hFⅨ적활성위100%-130%.결론:pLEGFP-N1-hFⅨ능유효지전도hUCT-MSCs,병재기자대세포중표체구유응혈활성적hFⅨ,저위hUCT-MSCs성위혈우병B기인치료적세포재체연구전정료기출.
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