华南国防医学杂志
華南國防醫學雜誌
화남국방의학잡지
MILLITARY MEDICAL JOURNAL OF SOUTH CHINA
2010年
4期
272-274,277
,共4页
熊畅%戢艳琼%罗强%刘先军%雷怀定%卢进昌
熊暢%戢豔瓊%囉彊%劉先軍%雷懷定%盧進昌
웅창%집염경%라강%류선군%뢰부정%로진창
肺癌%内皮细胞%凋亡%蛋白激酶B
肺癌%內皮細胞%凋亡%蛋白激酶B
폐암%내피세포%조망%단백격매B
目的 研究肺癌A549细胞条件培养基对血管内皮细胞凋亡的影响及机制.方法 以5%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)为对照,用人肺癌A549细胞株条件培养基孵育脐静脉内皮细胞(human umbilical veins endothelial cells,HUVECs),Annexin V-FITC试剂盒染色,流式细胞仪进行细胞凋亡定量.设计针对蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)基因mRNA的siRNA (siAkt1)和非特异性对照序列(siSCR)转染HUVECs,用RT-PCR技术检测Akt亚型mRNA的表达,用Western blotting 技术检测Akt总蛋白表达,并观察细胞凋亡的变化.结果 A549条件培养基明显抑制了HUVECs的凋亡(凋亡率3.03%,显著低于对照组的12.69%,P<0.05).筛选出的siAkt1能显著抑制HUVECs的Akt1 mRNA和Akt总蛋白表达(分别下调81%和62%),转染siAkt1后的HUVECs再用A549条件培养基孵育凋亡明显增强(与siSCR组相比P<0.01).结论 肺癌A549细胞条件培养基经Akt1途径抑制血管内皮细胞凋亡,这将为肺癌血管生成的机制研究和干预治疗提供新的分子靶点.
目的 研究肺癌A549細胞條件培養基對血管內皮細胞凋亡的影響及機製.方法 以5%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)為對照,用人肺癌A549細胞株條件培養基孵育臍靜脈內皮細胞(human umbilical veins endothelial cells,HUVECs),Annexin V-FITC試劑盒染色,流式細胞儀進行細胞凋亡定量.設計針對蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)基因mRNA的siRNA (siAkt1)和非特異性對照序列(siSCR)轉染HUVECs,用RT-PCR技術檢測Akt亞型mRNA的錶達,用Western blotting 技術檢測Akt總蛋白錶達,併觀察細胞凋亡的變化.結果 A549條件培養基明顯抑製瞭HUVECs的凋亡(凋亡率3.03%,顯著低于對照組的12.69%,P<0.05).篩選齣的siAkt1能顯著抑製HUVECs的Akt1 mRNA和Akt總蛋白錶達(分彆下調81%和62%),轉染siAkt1後的HUVECs再用A549條件培養基孵育凋亡明顯增彊(與siSCR組相比P<0.01).結論 肺癌A549細胞條件培養基經Akt1途徑抑製血管內皮細胞凋亡,這將為肺癌血管生成的機製研究和榦預治療提供新的分子靶點.
목적 연구폐암A549세포조건배양기대혈관내피세포조망적영향급궤제.방법 이5%태우혈청(fetal bovine serum,FBS)위대조,용인폐암A549세포주조건배양기부육제정맥내피세포(human umbilical veins endothelial cells,HUVECs),Annexin V-FITC시제합염색,류식세포의진행세포조망정량.설계침대단백격매B(protein kinase B,Akt1)기인mRNA적siRNA (siAkt1)화비특이성대조서렬(siSCR)전염HUVECs,용RT-PCR기술검측Akt아형mRNA적표체,용Western blotting 기술검측Akt총단백표체,병관찰세포조망적변화.결과 A549조건배양기명현억제료HUVECs적조망(조망솔3.03%,현저저우대조조적12.69%,P<0.05).사선출적siAkt1능현저억제HUVECs적Akt1 mRNA화Akt총단백표체(분별하조81%화62%),전염siAkt1후적HUVECs재용A549조건배양기부육조망명현증강(여siSCR조상비P<0.01).결론 폐암A549세포조건배양기경Akt1도경억제혈관내피세포조망,저장위폐암혈관생성적궤제연구화간예치료제공신적분자파점.
