草地学报
草地學報
초지학보
ACTA AGRESTIA SINICA
2010年
5期
714-718
,共5页
耿小丽%魏臻武%姚喜红%赵艳
耿小麗%魏臻武%姚喜紅%趙豔
경소려%위진무%요희홍%조염
苜蓿花药培养%再生植株%倍性检测%流式细胞仪
苜蓿花藥培養%再生植株%倍性檢測%流式細胞儀
목숙화약배양%재생식주%배성검측%류식세포의
本试验采用流式细胞仪对苜蓿(Medicago sativa L.)F1代杂种花药培养再生植株进行染色体倍性检测.旨在建立高效的苜蓿花药培养体系,提高苜蓿单倍体的诱导效率,寻求一种快速简便的苜蓿倍性检测方法.检测结果为流式细胞仪矩形图上清晰地检测出二倍体、三倍体、四倍体以及二倍体加四倍体的嵌合体.50株苜蓿花药再生植株中有42株四倍体(2n=4x),2n=4x与2n=2x的混合体为5株,二倍体(2n=2x)为2株,三倍体(2n=3x)为1株.本文还讨论了苜蓿花药培养体系的建立,优化,以及筛选出了适宜制作苜蓿细胞悬浮液的缓冲液(15 mmol·L-1 Tris-HCl(pH7.5);80 mmol·L-1 KCl;20 mmol·L-1 NaCl;2 mmol·L-1 EDTA-Na2;15 mmol·L-1 β-Mercaptoethanol;0.1%(V/V)TritonX-100;0.5 mmol·L-1 Spermine·4HCl)及其流式细胞仪检测苜蓿倍性的适应性程序.
本試驗採用流式細胞儀對苜蓿(Medicago sativa L.)F1代雜種花藥培養再生植株進行染色體倍性檢測.旨在建立高效的苜蓿花藥培養體繫,提高苜蓿單倍體的誘導效率,尋求一種快速簡便的苜蓿倍性檢測方法.檢測結果為流式細胞儀矩形圖上清晰地檢測齣二倍體、三倍體、四倍體以及二倍體加四倍體的嵌閤體.50株苜蓿花藥再生植株中有42株四倍體(2n=4x),2n=4x與2n=2x的混閤體為5株,二倍體(2n=2x)為2株,三倍體(2n=3x)為1株.本文還討論瞭苜蓿花藥培養體繫的建立,優化,以及篩選齣瞭適宜製作苜蓿細胞懸浮液的緩遲液(15 mmol·L-1 Tris-HCl(pH7.5);80 mmol·L-1 KCl;20 mmol·L-1 NaCl;2 mmol·L-1 EDTA-Na2;15 mmol·L-1 β-Mercaptoethanol;0.1%(V/V)TritonX-100;0.5 mmol·L-1 Spermine·4HCl)及其流式細胞儀檢測苜蓿倍性的適應性程序.
본시험채용류식세포의대목숙(Medicago sativa L.)F1대잡충화약배양재생식주진행염색체배성검측.지재건립고효적목숙화약배양체계,제고목숙단배체적유도효솔,심구일충쾌속간편적목숙배성검측방법.검측결과위류식세포의구형도상청석지검측출이배체、삼배체、사배체이급이배체가사배체적감합체.50주목숙화약재생식주중유42주사배체(2n=4x),2n=4x여2n=2x적혼합체위5주,이배체(2n=2x)위2주,삼배체(2n=3x)위1주.본문환토론료목숙화약배양체계적건립,우화,이급사선출료괄의제작목숙세포현부액적완충액(15 mmol·L-1 Tris-HCl(pH7.5);80 mmol·L-1 KCl;20 mmol·L-1 NaCl;2 mmol·L-1 EDTA-Na2;15 mmol·L-1 β-Mercaptoethanol;0.1%(V/V)TritonX-100;0.5 mmol·L-1 Spermine·4HCl)급기류식세포의검측목숙배성적괄응성정서.
