CAJ | 학술논문

目的:观察半月板纤维软骨细胞在不同配比壳聚糖/聚磷酸钙( chitosan/ calcium polyphosphate,CS/CPP)支架材料上的生长状况,优选最佳配比CS/CPP生物材料作为组织工程半月板支架材料.方法:采用机械分离与酶连续消化相结合的方法体外分离兔半月板纤维软骨细胞,单层培养传代至第3代,并对其进行表型鉴定.采用共混—化学交联固化—冷冻干燥法将CS、醛基化海藻酸钠(aldehyde alginate,ADA)、CPP有机地结合起来,制备4种不同配比的新型组织工程半月板复合支架材料.将体外分离培养的第3代半月板细胞,通过二次沉淀接种法将其种植于不同配比的CS/CPP支架上,体外培养7天,采用相差倒置显微镜、SEM、HE染色观察细胞在支架上的形态、黏附、生长情况.结果:体外分离培养的第3代半月板细胞基本维持纤维软骨细胞的表型.相差倒置显微镜下可见,细胞在支架上黏附良好；扫描电镜下可见,细胞在支架上均匀分布,细胞多数呈多角形,并有基质分泌；HE染色结果显示,有细胞长入到三维支架材料内部.其中,半月板细胞在3∶7的CS/CPP支架材料上单位面积内数目最多,生长最旺盛,细胞外基质分泌最多.结论:三维多孔的CS/CPP复合材料能促进半月板纤维软骨细胞的黏附、生长和增殖,其中3∶7的CS/CPP支架材料细胞相容性和生物活性最好,最适于半月板纤维软骨细胞粘附和生长,并且能促进半月板细胞增殖和维持其表型,有望成为组织工程半月板良好的支架载体.
목적:관찰반월판섬유연골세포재불동배비각취당/취린산개( chitosan/ calcium polyphosphate,CS/CPP)지가재료상적생장상황,우선최가배비CS/CPP생물재료작위조직공정반월판지가재료.방법:채용궤계분리여매련속소화상결합적방법체외분리토반월판섬유연골세포,단층배양전대지제3대,병대기진행표형감정.채용공혼—화학교련고화—냉동간조법장CS、철기화해조산납(aldehyde alginate,ADA)、CPP유궤지결합기래,제비4충불동배비적신형조직공정반월판복합지가재료.장체외분리배양적제3대반월판세포,통과이차침정접충법장기충식우불동배비적CS/CPP지가상,체외배양7천,채용상차도치현미경、SEM、HE염색관찰세포재지가상적형태、점부、생장정황.결과:체외분리배양적제3대반월판세포기본유지섬유연골세포적표형.상차도치현미경하가견,세포재지가상점부량호；소묘전경하가견,세포재지가상균균분포,세포다수정다각형,병유기질분비；HE염색결과현시,유세포장입도삼유지가재료내부.기중,반월판세포재3∶7적CS/CPP지가재료상단위면적내수목최다,생장최왕성,세포외기질분비최다.결론:삼유다공적CS/CPP복합재료능촉진반월판섬유연골세포적점부、생장화증식,기중3∶7적CS/CPP지가재료세포상용성화생물활성최호,최괄우반월판섬유연골세포점부화생장,병차능촉진반월판세포증식화유지기표형,유망성위조직공정반월판량호적지가재체.